miR-34a对HCMV感染的抑制作用机制及湘A1号方影响HCMV感染的探讨

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiezhen120
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目的:1.探讨mi RNAs的成员mi R-34a对于HCMV的调控作用及发挥作用的途径2.研究湘A1号方对HCMV的感染是否具有抑制作用。实验方法:通过包装慢病毒,WB,检测病毒DNA拷贝数,测定病毒成熟粒子释放量等方法首先确定mi R-34a对于HCMV是否发挥调控作用。其次运用在线软件分析其作用的靶位点,并利用荧光素酶报告系统和WB进行验证。随后对实验过程中发现的mi R-34a对于HCMV的进入可能具有抑制作用进行分析,通过检测HCMV的立即早期基因IE1及皮膜蛋白pp65的表达量,随后分析其抑制进入的途径。再者,将中药复方湘A1号方进行冻干,制作干粉,加入细胞,进行体外实验,观察其对HCMV是否具有抑制作用。结果:1.在HEL细胞和U-251 MG中,过表达mi R-34a可以使HCMV代表基因,DNA拷贝数及成熟病毒粒子释放量显著下降(P<0.05)。2.过表达mi R-34a后感染HCMV,发现IE1阳性率及pp65表达量显著下降。在U-251 MG细胞中,将其细胞表面受体PDGFR-α敲降后,IE1阳性率显著下降。3.正常HEL细胞感染HCMV后,加入湘A1号方可使其成熟病毒粒子释放量显著下降(P<0.05)。结论:1.在HEL细胞和U-251 MG中mi R-34a对HCMV的感染具有抑制作用,且其为直接靶向病毒基因而发挥作用。2.mi R-34a可以通过靶向细胞表面受体PDGFR-α抑制病毒的进入。3.湘A1号方可以抑制HCMV的感染。
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