河南省猪呼吸道隐性感染病原菌耐药分子特征

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猪呼吸道疾病是常见的多发性疾病,尤其是猪隐性呼吸道感染,由于症状不明显,易引起误诊或漏诊,而导致猪只长期处于亚健康状态,从而对养猪业危害较大。本试验对河南省8个不同地市114份猪源肺脏进行病原菌分离,并采用微量肉汤稀释法、PCR及测序分析代表性受试菌对常见药物的耐药表型特征及其耐药基因分子特性,以期为临床合理有效防控猪隐性呼吸道感染提供参考。本试验在114份猪肺脏(有明显病变)中共分离菌株245株,其中革兰阳性菌175株(71.43%),包括葡萄球菌70株,芽孢杆菌60株,链球菌12株,及其他33株;革兰阴性菌70株(28.57%),包括大肠埃希菌31株,肺炎克雷伯菌19株,其他阴性菌20株。说明临床导致猪呼吸道隐性感染的细菌菌种类较多。245株分离菌中有20.41%(50/245)为金黄色葡萄球菌、猪链球菌等致病菌,其中35株为金黄色葡萄球菌,占致病菌总数的70%,推测金黄色葡萄球菌为猪呼吸道隐性感染主要致病菌之一;53.41%(131/245)为条件致病菌,其中大肠埃希菌分离数量最多,说明其在呼吸道疾病的继发及混合感染起到一定作用。此外,在245株分离菌中共有133株为人畜共患(条件性)致病菌,具有重要的公共卫生学意义。耐药表型检测发现,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及葡萄球菌多重耐药明显,三类菌均对阿莫西林、氨苄西林高度耐药,对阿米卡星、庆大霉素高度敏感,敏感率在80%~100%。对环丙沙星、恩诺沙星、头孢吡肟较敏感,敏感率在77.14%~91.43%。而芽孢杆菌除了对泰妙菌素耐药明显(耐药率达(35.29%~63.64%),对其他常见药物较为敏感。同时,我们发现不同种类细菌对四环素类药物的耐药有明显差异,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和葡萄球菌对四环素的耐药明显较多西环素严重(P<0.01),且大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对四环素类药物的耐药率极显著高于葡萄球菌(P<0.01)。耐药基因检测发现,尽管大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和葡萄球菌的耐药表型特征趋于一致,但其携带的耐药基因有明显差异。大肠埃希菌主要检出TEM(61.29%)、tetA(87.10%)、tetM(54.84%)和flo R;肺炎克雷伯菌主要携带TEM(73.68%)、SHV(89.47%)、tetA(78.95%)、tet O(42.11%)和flo R;葡萄球菌的tetA(32.86%)、tetB(14.29%)、tet C(10.0%)、tetM(10.0%)、fexA(47.14%)、lsaA(35.71%)和lsaE(11.42%)检出率较高,而芽孢杆菌对泰妙菌素的耐药主要由vgaB(40.74%)和lsa E(14.63%)介导。综上所述,河南地区猪隐性呼吸道疾病肺脏携带细菌种类复杂多样,且73.82%(181/245)的分离菌有一定致病性,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、葡萄球菌及芽孢杆菌是最常见的四种分离菌,且前三种菌对临床常见药物有一定耐药,携带多重耐药基因;而芽孢杆菌除对泰妙菌素有明显耐药外,对其他药物敏感性较高。
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