猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）在猪群中广泛存在,被认为是引起猪免疫抑制的主要原因之一。PCV2疫苗的接种起到了一定的预防效果,这些疫苗通过体液免疫诱导保护。然而现有的研究表明,体液免疫不足以清除感染猪体内的PCV2病毒,疫苗免疫猪携带PCV2病毒的现象广泛存在,提示了 PCV2的完全保护可能需要细胞免疫的参与。但目前对于PCV2感染诱导的细胞免疫应答以及激活的T细胞识别的抗原表位尚无深入研究。BALB/c小鼠被广泛用作PCV2感染和疫苗评价的小动物模型,本课题利用此模型用于分析PCV2感染诱导的细胞免疫应答以及筛选PCV2 Cap蛋白上的小鼠T细胞表位。主要分为两部分工作:1、PCV2TB16毒株感染小鼠,在感染后的不同时间点,分别采集不同组织器官通过荧光定量PCR检测病毒含量;收集血清通过ELISA检测PCV2 Cap蛋白抗体效价;采集脾脏和淋巴结,制备单细胞悬液,通过多色流式分析NK细胞和不同T细胞亚群的动态变化和激活状态。结果显示,PCV2感染小鼠后病毒复制在第7天达到顶峰,随后开始下降,但能够在组织中持续存在至感染后第28天（至本试验结束）,其中,肺脏组织的病毒含量最高。在感染后第14天抗体滴度达到高峰并维持至第28天。这些结果表明PCV2成功感染小鼠,与预期一致。多色流式分析表明,PCV2感染后第7天NK细胞在脾脏和淋巴结中激活并增加,而γδ T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞出现减少的现象,呈现一种免疫抑制状态。但在第14天γδT细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、效应记忆T细胞和中央记忆性T细胞均增加明显,PD-1显著上调。感染后第28天效应记忆T细胞增加明显。通过胞内细胞因子染色发现感染后第28天的小鼠CD4+和CD8+T细胞在有丝分裂原刺激下能分泌更多的IFN-γ和TNF-α。2、采用IEDB数据库生物信息学在线软件,对PCV2 Cap蛋白上存在的小鼠或猪T细胞表位进行了预测,合成了 14条包含9-15个氨基酸的多肽。以PCV2感染或免疫后激活的T细胞为效应细胞,采用IFN-γ ELISpot筛选鉴定不同多肽激活小鼠T细胞分泌IFN-γ的能力。结果显示,PCV2感染激活的T细胞在第14天识别19号肽（116-125aa）、25 号肽（93-107aa）、26 号肽（89-103 aa）、27 号肽（144-158 aa）和 28 号肽（179-193 aa）;灭活的PCV2+脂质体佐剂免疫组激活的T细胞识别的表位为19号肽、25号肽和28号肽,而商用的PCV2疫苗激活的T细胞仅在免疫后第14天识别25号肽（93-107aa）,表明该疫苗主要诱导的是体液免疫并非细胞免疫。这些结果为进一步鉴定PCV2 Cap蛋白上的猪T细胞表位以及开发新型PCV2 T细胞疫苗提供了重要的数据和基础。