γMSCs对心梗早期中性粒细胞的迁移和细胞因子分泌的调控作用分析

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目的:本研究旨在探究心肌梗死后一天IFN-γ预处理的MSCs(γMSCs)对中性粒细胞体内外的迁移和分泌的细胞因子水平的影响,为干细胞治疗心肌梗死提供理论基础和可行性途径。方法:体内实验:选取C57雌性小鼠为实验对象,经肋间开胸进入胸腔,用7-0 prolene带针缝线在冠状动脉左前降支(LAD)末端三分之一处进行结扎,从而建立心肌梗死模型,同时对治疗组进行γMSCs心肌内注射治疗,观察心肌梗死一天后小鼠心梗区域中性粒细胞的浸润水平,并对心梗组织进行Ly6G表达量分析;同时应用胶原酶消化心肌组织通过磁珠分选获取单个的中性粒细胞并进行计数。体外实验:将骨髓中性粒细胞与IFN-γ预处理的MSCs进行共培养,然后将共培养的中性粒细胞放入趋化培养基中进行趋化能力检测;将共培养后的中性粒细胞进行W estern bolt实验检测与中性粒细胞趋化相关的TLR4的表达水平;将共培养后的中性粒细胞进行RT-qPCR实验检测促炎和抑炎细胞因子的表达水平。结果:体内实验中,心梗组织中Ly6G+中性粒细胞在IFN-γ预处理的MSCs组中显著减少;磁珠分选获得单个中性粒细胞并进行计数后与免疫荧光结果相同;同时RT-qPCR结果显示,心脏组织中性粒细胞的特异基因Ly6G表达量也显著降低。体外共培养结果显示,IFN-γ预处理的MSCs可以降低中性粒细胞向趋化培养基的迁移能力;除此之外,共培养后的中性粒细胞表达的TLR4和促炎细胞因子受到抑制,而抑炎细胞因子的表达升高。结论:综上所述我们发现γMSCs可以减少中性粒细胞向心梗部位的趋化作用;同时γMSCs可以减少中性粒细胞中TLR4和促炎/趋化因子的表达,增加抑炎细胞因子的表达,为MSCs对心肌梗死的治疗提供了临床治疗的新思路和途径。
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