神农架川金丝猴粪便类固醇激素的非损伤性测定及其指示作用研究

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野生动物类固醇激素的非损伤性测定及其生理指示作用日益得到应用,并取得了较快的进展。缘于野生川金丝猴(Rhinopithecus roxellanae)的研究样本获取及保存原因,其(?)种群的生态生理学研究尚缺乏深入的研究。鉴于此,本论文于2007年起以神农架自然保护区的川金丝猴种群为研究对象,采用粪便类固醇激素的非损伤性研究方法,研究该物种新鲜粪便的保存方法及保存实效,探查其繁殖生物学特性、应激生理状态,以期对野生川金丝猴的有效保护提供科学依据。主要研究结果如下:1.依据川金丝猴分布区的气候特征及野外可获得的低温条件,选择低温条件(4±1℃)和95%乙醇保存新鲜粪便,在7个设定天数(5天、6天、7天、8天、10天、20天、30天)时间段,采用RIA法测定类固醇激素的含量。结果表明,雌性川金丝猴粪样内睾酮和雌二醇在各个保存时间段的平均值均与标准参照值无显著差异(P>0.05),可以稳定保存30天;孕酮含量在保存10天时显著低于标准参照值(P<0.05),可以稳定保存9天;皮质醇含量在保存6天时显著低于标准参照值(P<0.05),因此可以稳定保存5天;雄性川金丝猴粪样中睾酮、皮质醇在保存6天时的平均值显著低于、高于标准参照值,因此可以稳定保存5天。2.在常温和95%乙醇保存条件下,测定24h内川金丝猴新鲜粪便内类固醇激素的保存效果。结果显示,除雌性粪样内皮质醇在保存1天时含量即显著低于标准参照值之外,其它类固醇激素在两种性别的粪样中均无明显变化,可以稳定保存24h。本实验的结果提示,川金丝猴粪样内睾酮、孕酮、雌二醇、皮质醇4种激素在不同性别、不同保存条件下的保存时效并不一致,实际运用时需要结合研究目的区别对待。3.糖皮质激素水平与川金丝猴不同等级地位个体间的研究表明,在交配盛期等级地位低的雌性或雄性个体,其粪便糖皮质激素水平均高于高等级个体;非交配盛期这种关联性则不明显。此外,雌性糖皮质激素全年平均水平高于雄性,这可能与川金丝猴一雄多雌的繁殖体系有关系。川金丝猴雄性中引起从属地位个体生殖抑制的原因与在繁殖期糖皮质激素高水平显示出一定的关联性,但仅用这一指标的高或低来解释社会性物种从属地位个体的生殖抑制现象还存在诸多问题,有待今后进一步的研究。4.雄性川金丝猴的睾酮水平与社群关系的研究表明,睾酮分泌峰值能够反映雄性个体之间的个体争斗和紧张程度。本研究中三只主雄的粪便睾酮值在交配盛期都显著高于非交配盛期,说明雄猴对交配盛期雌猴频繁发起的性刺激是有反应的,睾酮的大量分泌可提高雄性川金丝猴的发情能力,可能有利于维系川金丝猴一雄多雌的繁殖体系。5.雌性川金丝猴粪便内雌二醇水平的测定显示,粪便内雌二醇含量的变化能够用于该物种的早孕诊断及推测受精日期和产仔日期,而孕酮值对妊娠的诊断效果不及雌二醇。育龄期内川金丝猴滤泡期的雌二醇水平会随着年龄的增长而降低,因此也会导致生殖能力随着年龄的增加而降低。
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