研究背景:近年来,随着发病率和死亡率的不断提升,肝癌和胆囊癌已成为人类生命健康的重要威胁。目前临床上肝癌和胆囊癌的治疗策略以手术切除为主,但是由于早期诊断困难,这两种癌症的大部分患者被诊断时,病程已进展到中晚期并错失手术切除最佳时机。此外,受限于对肝癌和胆囊癌分子发病机制的深入了解,以及缺少有效的治疗措施和抗肿瘤药物,这两种癌症患者的预后都不甚理想。长链非编码RNA是基因表达的关键调控因子,并在许多人类癌症中发挥着重要作用。研究发现,长链非编码RNA(lncRNA)SNHG16在许多不同类型的人类肿瘤里面异常高表达,并作为竞争性内源RNA,通过结合miRNA,调控下游基因的表达促进肿瘤的发生进展。细胞周期紊乱和上皮间质转化是肿瘤细胞的重要特征,但是SNHG16在肿瘤细胞周期调控和上皮间质转化(EMT)中的功能和机制还没有得到系统的研究,很大程度上仍然是不清楚的。研究目的:本研究旨在系统阐释lncRNA SNHG16在肝癌细胞周期调控和EMT过程中的作用和分子调控机制,研究SNHG16的表达与肝癌细胞对肿瘤药物敏感性的关系,并揭示SNHG16调控胆囊癌细胞周期的分子机制。研究方法:本研究采用实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)和蛋白质印记分析(western blot),检测lncRNA SNHG16,miRNA以及下游调控基因在肿瘤组织或者细胞的表达模式。通过绘制生存曲线,分析SNHG16表达与肝癌患者预后的关系。通过慢病毒感染以及药物筛选,获得敲低SNHG16的肝癌和胆囊癌细胞株。应用流式细胞仪进行细胞周期、凋亡分析,并通过western blot分析细胞周期、凋亡、EMT相关基因的蛋白质表达。通过体外细胞实验,如MTT实验,克隆形成实验,细胞划痕实验,Transwell侵袭实验等研究敲低SNHG16对肝癌或者胆囊癌细胞的体外增殖,迁移和侵袭能力的影响。通过动物实验,探究SNHG16下调对肝癌或者胆囊癌细胞的体内增殖、转移能力的影响。通过计算IC50分析肝癌细胞中SNHG16表达与顺铂和阿帕替尼药物敏感性关系。结合生物信息学分析,双荧光素酶报告基因实验,RNA结合蛋白免疫沉淀实验(RIP),体外细胞功能实验,补救实验,基因表达相关性分析等,揭示SNHG16促进肿瘤发生和进展的精确分子机制。研究结果:本研究发现lncRNA SNHG16在肝癌癌组织和细胞高表达,SNHG16表达与肝癌患者生存率负相关,SNHG16高表达的患者预后更差,敲低SNHG16能够增加肝癌细胞对顺铂和阿帕替尼的药物敏感性。肝癌里面lncRNA SNHG16作为竞争性内源RNA,通过SNHG16/let-7b-5p/CDC25B/CDK1轴参与了肝癌细胞周期分子调控网络,以及通过SNHG16/let-7b-5p/HMGA2轴参与了肝癌细胞上皮间质转化分子调控网络。同时,SNHG16在胆囊癌癌组织和细胞高表达,并作为竞争性内源RNA通过SNHG16/miR-3138/CDC25B/CDK1轴参与了胆囊癌细胞周期和增殖的分子调控网络。研究意义:本研究系统分析并揭示了lncRNA SNHG16参与肿瘤细胞周期、EMT调控的分子网络,以及肝癌细胞中SNHG16表达和肿瘤药物敏感性关系,加深了我们对lncRNA SNHG16功能的了解,为长链非编码RNA信号途径参与肿瘤发生和进展,以及为揭示肝癌和胆囊癌的分子致病机理提供了新的见解和思路,也为提高肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性、寻找新的肿瘤治疗靶点提供了理论基础。