烟夜蛾(Helicoverpa assulta Guenée)幼虫中肠Bt Cry1Ac毒素受体蛋白cDNA的克隆

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利用RT—PCR技术扩增烟夜蛾Helicoverpa assulta Guenée幼虫中肠Bt毒素CryIAc受体蛋白基因,进行克隆和测序,结果表明,所测序出的812bp的片段编码270个氨基酸残基,且这个片段在阅读框内。通过同源性分析发现,其核苷酸序列与棉铃虫(Helicoverpa armigera)、斑实夜蛾(Helicoverpa punctigera)、烟芽夜蛾(Heliothis virescens)、舞毒蛾(Lymantria dispar)、小菜蛾(Plutella xylostella)、印度谷螟RC688品系(Plodia interpunctella)、印度谷螟HD198品系、烟草天蛾(Manduca sexta)和家蚕(Bombyx mori)的CryIAc受体蛋白基因的同源性分别是97%、90%、78%、63.5%、55%、60.3%、61.2%、55%和59%。推导的烟夜蛾CryIAc受体蛋白基因的氨基酸序列与棉铃虫,烟芽夜蛾、斑实夜蛾、舞毒蛾的氨基酸序列的同源性分别高达95.6%、81%、82.7%、55.7%。且这个片段编码的氨基酸属于氨肽酶家族,与烟夜蛾对Bt CryIAc毒素的抗性有关。 利用RT—PCR技术扩增烟夜蛾一~六龄幼虫中肠Bt毒素CryIAc受体蛋白基因(APN),结果均有带,表明烟夜蛾一~六龄幼虫中肠内APN基因在转录水平上均表达,Bt毒素对整个幼虫期均有毒杀效果,这是首次对烟夜蛾的APN基因在转录水平上表达进行研究,为Bt的合理运用打下基础。
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