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银荷方为王永炎院士的临床经验方,由银杏叶、三七、人参、荷叶组成,具有益气通阳,活血通络的功效,主治冠心病,心气不足,心血淤阻证。本课题组前期对银荷方进行了制备工艺研究,建立了银荷方提取工艺和富集工艺,并开展了药效实验关联考量研究,结果表明银荷方富集物组合物活血止血作用最强。本论文主题为银荷方药物质量控制体系研究,即进行制备物、组合物与组方药味关联质量控制研究,并结合不同配比的组合物药效考量,通过药学-药效学关联分析,确定具备最佳活血止血作用的药物组合形式与最佳药物质量存在形式,从而建立银荷方药物质量控制体系。本论文共分六章。第一章文献综述对银荷方各组方药味的研究现状进行综述。综述了组方药味的化学成分及药理作用,共引用文献45篇,经文献分析确定出本论文立题。第二章银荷方药物质量控制方法研究采用分光光光度法,建立了制备物及组合物中总酚、总萜、总氨基酸、总生物碱、总内酯含量测定方法。采用HPLC法,建立了制备物及组合物指标性成分qn、kl、in、pr、gg、gr、gb、ne的含量测定方法。建立了系列富集物HPLC特征图谱定性质量控制方法。采用分光光度法,建立了组方药味中总氨基酸、总酚、总生物碱、总萜、总内酯含量测定方法。采用HPLC法,建立了三七中三七素、槲皮素、山奈酚及异鼠李素的含量测定方法及三七酚类成分特征图谱定性质量控制方法;建立了银杏叶中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量测定方法;建立了荷叶中金丝桃苷、异槲皮苷及荷叶碱的含量测定方法及特征图谱定性质量控制方法。第三章银荷方制备物及组合物质量控制研究本章为第二章所建立的质量控制方法的应用,测定了制备物及组合物各有效成分含量及特征图谱,并对制备物及组合物进行了 TLC定性鉴别。测定了富集物Ⅰ中总酚、总氨基酸、三七素的含量。测定了富集物Ⅱ中总酚及qn的含量;建立了富集物Ⅱ HPLC特征图谱,特征图谱应有6个特征峰,以qn为参照物,其中1个峰应与参照峰保留时间相同,与qn参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为0.540、0.614、0.676、0.776、1.000、1.046（按出峰时间排序）。测定了富集物Ⅲ中总酚、总生物碱、总内酯、总萜、qn、kl、in、pr、gg、gr、gb及ne的含量。建立了富集物Ⅲ HPLC特征图谱,特征图谱Ⅰ（203nm）应有25个特征峰,以pr、gg、gr、gb为参照物,其中4个峰应与参照峰保留时间相同,与gg参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为0.149、0.209、0.225、0.267、0.296、0.309、0.363、0.400、0.425、0.481、0.529、0.549、0.598、0.621、0.872、0.887、1.000、1.025、1.056、1.152、1.176、1.248、1.323、1.546、1.666（按出峰时间排序）;特征图谱Ⅱ（270nm）应有8个特征峰,以qn、kl、in为参照物,其中3个峰应与参照峰保留时间相同,与qn参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为23.449、27.581、29.602、36.195、38.023、39.800、45.884、47.629（按出峰时间排序）。对富集物Ⅲ进行了 T LC定性鉴别。测定了制备比例组合物中总酚、总生物碱、qn、kl、in、pr、gg、gr、gb及ne的含量。对制备比例组合物进行了 TLC定性鉴别。第四章银荷方药味质量控制研究采用第二章所建立的测定方法,测定了不同批次组方药味中各成分含量及特征图谱,并进行关联分析,筛选出关联度较高的药材或饮片。测定了不同批次三七中总酚、总生物碱、总氨基酸、总萜、三七素、槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量,并进行了关联分析,筛选出关联度较高的药材;测定了三七HPL C特征图谱,特征图谱应有9个特征峰,以槲皮素、山奈酚、异鼠李素为参照物,其中3个峰应与参照峰保留时间相同,与槲皮素参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为 0.1606、0.1941、0.5177、0.6495、1.0000、1.1360、1.1528、1.3990、1.4486（按出峰时间排序）。对三七进行了 TLC定性鉴别。测定了不同批次银杏叶中总酚、总内酯、槲皮素、山奈酚、异鼠李素含量,并进行了关联分析,筛选出关联度较高的饮片。测定了银杏叶HPLC特征图谱,特征图谱应有11个特征峰,以槲皮素、山奈酚、异鼠李素为参照物,其中3个峰应与参照峰保留时间相同,与槲皮素参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为0.129、0.177、0.468、0.540、0.627、0.760、0.774、1.000、1.045、1.207、1.253（按出峰时间排序）。对银杏叶进行了 TLC定性鉴别。测定了不同批次荷叶中总酚、总生物碱、金丝桃苷、异槲皮苷、荷叶碱含量,并进行了关联分析,筛选出关联度较高的饮片。测定了荷叶HPLC特征图谱,特征图谱应有7个特征峰,以金丝桃苷、异槲皮苷、荷叶碱为参照物,其中3个峰应与参照峰保留时间相同,与荷叶碱参照峰相应的峰为S峰,各特征峰相对保留时间分别为0.254、0.328、0.387、0.419、0.676、1、1.038（按出峰时间排序）。对荷叶进行了 TLC定性鉴别。测定了不同批次人参中总氨基酸、总生物碱、总萜、酚类指标性成分及皂苷类指标性成分含量,并进行了关联分析,筛选出关联度较高的饮片。对人参进行了 TLC定性鉴别。第五章 银荷方药学-药效质量表征关联研究采用血栓和抗凝药效模型,以血浆中TXB2、6-keto-PGF1a、凝血酶原PTHR以及凝血酶THR含量为生化指标,对不同配比的组合物（将系列富集物按不同比例配比,得A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组、H组、P组、Q组、R组、S组）进行药效验证,得出血栓模型中药效最佳为B组,抗凝模型中药效最佳为F组。并通过药学-药效学关联分析,确定了最佳药效的药物质量表征形式及发挥药效的有效物质基础。第六章总结与讨论对全文进行总结。