基于脱氧核糖核酸的纳米靶向药物递送载体的制备与应用

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脱氧核糖核酸(DNA)是进行生物储存其遗传信息的生物大分子。自从上世纪五十年代发现了DNA分子结构以来,由于其具有可编程性、相对高的稳定性和链方向记忆性等结构上的特点,DNA逐渐成为了一种在药物递送领域中热门的研究物质。本论文创新性地设计并合成了整合有载药区域、DNA适配体和pH敏感型DNA垫片于一体的DNA纳米粒,并研究了其包载抗癌药的能力,及载药纳米粒被肿瘤细胞选择性摄取的能力。本论文主要包括三大部分。在第一部分中,首先创新性地设计了集载药区域、DNA适配体和pH敏感型DNA垫片于一体的单链DNA模板。通过预实验中电子显微镜的结果验证了此设计的可行性。在第二部分中,以设计的DNA模板为起始物质,通过杂化反应、连接反应与滚环扩增等生物化学反应制备了具有载药能力、靶向能力和pH响应型释药能力的DNA纳米粒。此外,通过多重光散射仪Turbiscan Lab对其合成过程进行研究,通过显微镜学角度(光学显微镜、电子显微镜及原子力显微镜)、颗粒学角度(纳米粒子跟踪分析)和药学角度(载药机理研究)对DNA纳米粒上进行多角度表征与研究。第三部分中,应用制备的DNA纳米粒进行了载药实验。通过对DNA纳米粒载药能力的评价,确定了在制备载药纳米粒时的投料比例。通过体外药物释放实验,结果表明在释放204分钟时,载药DNA纳米粒在酸性环境中(pH=5.4)的药物累积释放率是中性环境中(7.4)的4.26倍,证明了载药DNA纳米粒具有pH响应型释药的能力。进一步地,通过进行核酸适配体靶点细胞与非靶点细胞对DNA纳米粒的摄取实验,结果证实了DNA纳米粒具有在细胞水平上的靶向能力。以上研究内容国内外尚未见文献报导。
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