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目的:针对紫杉醇化疗非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,简称NSCLC)产生的耐药性及其对正常肝细胞产生的损伤作用,本实验研究姜黄素(Curcumin)及紫杉醇(Paclitaxel)单独或联合用药对非小细胞肺癌细胞增殖、调亡的影响,并探究姜黄素提高紫杉醇对非小细胞肺癌化疗敏感性的作用及其机制,同时进一步探讨姜黄素对紫杉醇所致肝损伤的影响。方法:(1)分别在体外培养非小细胞肺癌细胞A549细胞和人正常肝细胞L-02细胞,传代培养待细胞处于对数生长期时,按如下分组情况进行药物干预48 h:空白对照组(不加任何药物,仅有细胞培养液)、姜黄素组(依次加入2.5、5、10、20、40μmol/L的姜黄素溶液,仅A549细胞设置该组),紫杉醇组(依次加入0.06、0.125、0.25μmol/L的紫杉醇溶液),联合用药组(5μmol/L的姜黄素+0.06μmol/L的紫杉醇溶液、5μmol/L的姜黄素+0.125μmol/L的紫杉醇溶液、5μmol/L的姜黄素+0.25μmol/L的紫杉醇溶液),应用CCK-8法检测两种细胞各分组的细胞增殖情况,并筛选出两药联合用药时适当的浓度(本实验选用5μmol/L的姜黄素+0.125μmol/L的紫杉醇溶液),用于后续实验;(2)按照上述筛选出的姜黄素与紫杉醇浓度,再次将实验分为4组:空白对照组(不加任何药物,仅有细胞培养液)、姜黄素组(5μmol/L的姜黄素溶液),紫杉醇组(0.125μmol/L的紫杉醇溶液),联合用药组(5μmol/L的姜黄素+0.125μmol/L的紫杉醇溶液),分别作用A549细胞和L-02细胞48 h后,应用流式细胞凋亡实验检测两种细胞各组的细胞凋亡情况;(3)对于按上述分组干预过的A549细胞,采用Western blotting检测各组细胞中STAT3、Bcl-2、Bax相关蛋白的表达水平;(4)对于按上述分组干预过的L-02细胞,采用ELASE法检测各组L-02细胞上清液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的浓度。结果:1、CCK-8实验结果显示:(1)姜黄素和紫杉醇对A549细胞均具有细胞增殖抑制作用,且呈浓度依赖性;与单一用药组相比较,联合用药组对A549细胞的增殖抑制更加明显(p<0.05);(2)紫杉醇对L-02细胞亦有增殖抑制作用,且随着药物浓度的不断增加,其对L-02细胞的增殖抑制率也增加;然而,与同等剂量紫杉醇组相比,联合用药组对L-02细胞的增殖抑制率明显降低(p<0.05);2、流式细胞术检测实验结果显示:(1)与空白对照组比较,姜黄素组和紫杉醇组对A549细胞凋亡率显著增高(p<0.05),而联合用药组较单用药组的细胞凋亡效果更加明显(p<0.05);(2)紫杉醇组对L-02细胞凋亡率显著高于空白对照组(p<0.05),但是联合用药组的细胞凋亡率明显低于同等剂量的紫杉醇组(p<0.05);3、Western blotting结果显示:与空白对照组相比较,姜黄素组、紫杉醇组的A549细胞中STAT3、Bcl-2表达降低,Bax表达显著升高(p<0.05);而联合用药组与单药组相比,其A549细胞中STAT3、Bcl-2表达更低,Bax表达明显较高(p<0.05);4、ELASE法检测ALT、AST结果显示:紫杉醇组L-02细胞上清液中ALT、AST浓度明显高于空白对照组,且结果具有显著性差异(p<0.05);与相同剂量的紫杉醇组相比,联合用药组细胞上清液中ALT、AST的浓度显著降低(p<0.05)。结论:(1)姜黄素与紫杉醇均对A549细胞有增殖抑制和促进凋亡的作用,且均表现出浓度依赖性,低剂量姜黄素与紫杉醇联合作用较单用药更加明显,提示二者在抑制A549细胞增殖和促进凋亡方面具有协同作用,且二者对A549细胞的凋亡作用机制可能与下调STAT3、Bcl-2,上调Bax有关。(2)紫杉醇对L-02肝细胞具有增殖抑制和促进凋亡的作用,且随着药物浓度的升高,效果越明显,与低剂量姜黄素与紫杉醇联合用药组相比,等剂量紫杉醇组作用L-02细胞后的细胞增殖抑制和促进凋亡作用更明显,且其上清液中ALT、AST浓度较联合用药组明显升高,这表明低剂量姜黄素能够减轻紫杉醇所致的肝损伤。