黄瓜(Cucumis sativus)是我国第一大设施蔬菜作物,在世界上广泛栽培。CRISPR/Cas9系统是由RNA介导的基因组定点编辑技术,具有突变效率高、成本低且易于操作特点。与传统的转基因技术相比,CRl[SPR/Cas9技术可以通过杂交的方式将外源片段导出,不留下转基因痕迹,因此在作物遗传改良与育种研究中具有更广阔的应用前景。目前CRISPR/Cas9技术已在拟南芥、烟草、小麦、水稻、玉米和番茄等不同植物基因组的定向编辑研究中成功应用。但是,由于黄瓜的遗传转化技术还不够成熟,影响了 CRISPR/Cas9基因编辑技术在黄瓜育种中的应用。株高是影响黄瓜产量的重要农艺性状。目前生产上主栽的黄瓜品种大多为蔓生,其节间长,植株高,需要人工搭架引蔓和整枝。矮生黄瓜品种,株型紧凑,适合密植,更能充分利用土地和光照资源,不仅可以提高群体产量,而且还可以简化栽培技术和农艺设施,节省人力、物力和财力。CsVFB1基因参与调控黄瓜株高性状。本研究以黄瓜CU2为材料,通过农杆菌介导的方法,利用CRISPR/Cas9技术将CsVFB1基因敲除,获得了矮生黄瓜植株。主要结果如下:1、改造了 CRISPR/Cas9载体,插入GFP报告基因,用于筛选转基因阳性植株;2、建立了以黄瓜下胚轴为外植体的瞬时转化体系,用于对靶点的突变效率进行检测;3、以子叶为外植体,优化了黄瓜的遗传转化体系。包括Kan筛选压的确定、抗菌素的选择等;4、运用CRISPR/Cas9技术成功敲除了黄瓜VFB1基因,获得了转基因矮生黄瓜植株TO代。