鸡矢藤多糖的免疫调节活性研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tansb87
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]从鸡矢藤中提取分离得到鸡矢藤多糖(Paederia scandens.polysaccharide,PSP),研究评价PSP对巨噬细胞及免疫抑制小鼠的免疫调节活性,以及PSP的急性毒性。为鸡矢藤多糖的深入研究开发与应用提供一定的理论依据。[方法](1)探索制造免疫抑制小鼠模型的方法,确定阳性对照药物。通过环磷酰胺(Cyclophosvnamide,CY)诱导建立免疫抑制小鼠模型,模型组、金水宝组和左旋咪唑组在实验第3、5、7、9天腹腔注射CY50mg/kg以制造免疫抑制小鼠,连续给药10天。实验终点比较各组小鼠的体质量、胸腺指数、脾脏指数、肠道派氏结(Peyer’s Patches,PPs)个数和细胞因子含量变化,进而评价造模方法是否可行,哪种药物更适合做体内实验阳性对照物。(2)对鸡矢藤多糖的免疫调节活性进行预实验。采用水提醇沉法提取得到鸡矢藤多糖。研究PSP的体外免疫调节活性,采用MTT试剂检测不同浓度PSP作用于Raw264.7巨噬细胞后细胞增殖率的变化;采取中性红吞噬实验考查不同浓度PSP作用于Raw264.7细胞后细胞吞噬率的变化;采用ELASA检测不同浓度PSP作用于Raw264.7细胞后细胞因子表达水平的变化。研究PSP的体内免疫调节活性,实验方法参照(1)中筛选阳性对照物实验。另外采用流式细胞仪检测派氏结细胞中CD3+、CD19+和CD4+淋巴细胞表型及其比例。(3)鸡矢藤多糖的免疫调节活性实验。用鸡矢藤配方颗粒采用水提醇沉法提取得到鸡矢藤多糖(Paederia scandens.polysaccharide,PSP),对其免疫调节活性研究参照(2)中实验方法,从体内和体外两方面进行实验研究。(4)用鸡矢藤配方颗粒中提取得到的PSP进行急性毒性实验。实验分为对照组和PSP实验组,PSP实验组按小鼠最大灌胃体积:40 mL.kg-1,以PSP最大溶解浓度300mg.mL-1,每5h灌胃1次,一日2次,对照组按相同方式纯水灌胃。实验过程中紧密观察并记录小鼠各方面表现,实验结束将动物处死、解剖,观察内脏是否有改变,对主要脏器称重并进行组织病理学观察。[结果](1)PSP体内实验的阳性对照药物筛选实验结果显示,环磷酰胺腹腔注射建立免疫抑制小鼠模型成功。左旋咪唑组的免疫抑制小鼠体质量增加值、胸腺指数、脾脏指数、派氏结个数和小鼠肠道分泌的IL-4和IL-8量较金水宝组更高,因此,左旋咪唑更适合做小鼠体内实验的阳性对照物。(2)PSP的免疫调节活性预实验结果显示,PSP在体外实验中能促进巨噬细胞的增殖以及对中性红的吞噬能力,能不同程度的促进Raw264.7巨噬细胞分泌IL-6、IL-2、IL-8、TNF-α、NO和IFN-γ等细胞因子。在体内实验中PSP能一定程度恢复环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的体质量、胸腺指数、脾脏指数、派氏结数量、派氏结中CD3+、CD19+和CD4+淋巴细胞比例和小鼠血清中NOS、H2O2的含量。(3)PSP的免疫调节活性实验结果显示,PSP能促进巨噬细胞的增殖以及对中性红和FITC-dextran 40的吞噬能力,能促进Raw264.7巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α、NO、NOS和H2O2因子。PSP对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的体质量、胸腺指数、脾脏指数、派氏结中CD3+、CD19+和CD8+淋巴细胞比例、小鼠血清中IL-10和IgG的含量,以及肠内容物上清中sIgA和IL-12p70的含量有一定恢复作用。(4)PSP的急性毒性实验结果显示:雌、雄小鼠PSP给药组的一般状态、死亡情况和组织病理学与空白对照组相比均无明显异常;鼠粮消耗量、体重变化情况、体质量增加值和脏器指数(胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数和肾脏指数)与空白对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。[结论]本研究采用水提醇沉法得到鸡矢藤多糖,从体内和体外水平对其免疫调节活性进行研究。预实验表明PSP能促进Raw264.7巨噬细胞的增殖、吞噬和分泌相关细胞因子,并能够抵抗CY所致的免疫抑制。正式实验进一步证实了预实验的研究结果。急性毒性实验表明PSP毒性极低。以上实验为鸡矢藤多糖的进一步研究开发和应用提供了一定的理论基础。
其他文献
[目的]虽然近年来PDAC在手术、化疗、靶向治疗等方面已经取得了很大进展,但是PDAC患者的预后仍不理想。目前,许多相关研究集中在PDAC肿瘤微环境。本文旨在研究PDAC肿瘤微环境中的肿瘤浸润性T淋巴细胞和Ki-67指数的临床意义和预后分析,为进一步研究PDAC提供一些参考和依据。[方法]本研究纳入2015年6月至2019年12月期间在昆明医科大学第二附属医院行PDAC根治性切除手术治疗的75例患
[目的]研究对比经皮经肝胆囊穿刺引流(percutaneous transhepatic gallbladder drainage,PTGD)序贯腹腔镜胆总管探查术(laparoscopic common bile duct exploration,LCBDE)+腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)+T管引流与一期行LCBDE+LC+T管引流治疗胆总管
[目的]探讨胆囊癌患者淋巴结转移的危险因素,为胆囊癌的综合治疗及预后评估提供参考。[方法]1.研究对象:收集2013年1月1日至2020年9月30日我院行胆囊癌根治术且术后病理检查证实为胆囊腺癌患者的临床及病理资料。2.研究内容:分析胆囊腺癌患者的临床及病理资料与淋巴结转移的关系。并根据淋巴结病检结果将胆囊腺癌患者分为两组:有淋巴结转移组和无淋巴结转移组。收集的临床及病理资料包括:(1)一般临床资
[目的]Betatrophin是由肝脏分泌的激素样蛋白质,有研究报道其可促进正常成体胰岛β细胞增殖。目前研究发现多数胰岛相关疾病都涉及胰岛β细胞数量及功能的改变。我们前期研究发现ISL-1在成体胰岛β细胞中具有重要的抗凋亡和促增殖双重功能,其在磷酸化状态下发挥抗凋亡功能,而在去磷酸化状态下发挥促增殖功能。但ISL-1发挥双重功能时的上游调控分子仍不清楚,本研究重点为明确Betatrophin是否通
[目 的]通过对昆明市儿童医院6年355例住院结核患儿的临床资料进行分析,总结儿童各型结核病的临床特征及流行病学特点,以提高对儿童结核病的认识,做到早诊断、早治疗,减少漏诊、误诊。[方 法]回顾性分析2014年1月-2019年12月昆明市儿童医院0-18岁的结核病住院患儿临床资料,包括患儿年龄、性别、民族、地区分布等一般资料、病史、症状、体征、实验室检查、影像学检查、预后及院前就诊经历等。使用SP
[目 的]本研究旨在通过对比CT引导下经皮肺穿刺活检术(percutaneous transthoracic pulmonary biopsies,PTPB)和经支气管镜下肺穿刺活检术(transbronchoscopic lung biopsy,TBLB)的穿刺阳性率,并发症及其影响因素,探讨两者对诊断肺部占位性病变的诊断价值,分析两者并发症发生率及相关影响因素,以预防、降低或避免并发症的发生,
[目的]探究儿童急性肝衰竭病因分布并分析影响儿童急性肝衰竭预后的相关风险因素。[方法]收集昆明市儿童医院2016年11月至2020年9月诊断为急性肝衰竭患儿的临床资料,根据预后分有效组与无效组,对其病因、主要临床表现和预后进行分析,比较2组重要生化指标及临床表现差异与预后的关系。统计学方法主要采用EXCEL2016及SPSS21.0分析。[结果](1)共64例肝衰竭患儿,男27例,女37例;年龄1
[目 的]急性缺血性脑卒中(acute ischemics stroke,AIS)在早期有不同的干预手段,包括阿替普酶(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓治疗、尿激酶(urokinase,UK)静脉溶栓治疗、桥接动脉内取栓治疗以及保守常规治疗等。本课题分析发病6小时内到我院治疗的AIS患者,接受rt-PA、UK静脉溶栓治疗、桥接动
[目的]探讨胆管损伤的预防手段、临床分组及非计划胆道修复术的选择。[方法]回顾性分析我院2016年1月至2019年9月收治的36例胆管损伤病人的临床资料。术中发现2例,术后发现但无急性腹膜炎表现34例,按临床症状分为胆漏组17例、胆管狭窄组10例、胆漏合并胆管狭窄组7例。术中发现的非计划胆道修复术为:胆管修补术+T管引流术2例,术后发现的非计划胆道修复术为:胆管修补术+T管引流术2例,胆道探查术+
[目 的]宫颈癌是全世界女性中第二大最常见的恶性肿瘤,仅次于乳腺癌。正常健康女性阴道微生态主要由阴道正常解剖结构、阴道微环境因子、阴道菌群及机体内分泌调节四个方面共同保持稳定,因此阴道微生态的平衡与阴道内微生物菌群、阴道微环境因子之间有着密切的关系。不良的阴道微生物群被认为是持续性HPV介导的宫颈癌变和生殖器炎症的原因,其机制尚不清楚。对宫颈阴道微环境分析有可能揭示宿主与微生物之间在HPV持续性发