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目的:中风（其中缺血性中风约80%）在世界上已经是排名第二的死亡疾病了,还是排名第一导致成年人残疾的疾病。中风以及其后遗症给个人、家庭和社会经济带来了极重的负担。目前,临床上应用的血管再通术（t-PA）是较为有效的治疗方法,但其余治疗方法如抗兴奋性毒性、抗氧化凋亡、改善能量代谢等,由基础研究应用到临床时效果均不显著。因此找寻中风后神经功能缺损主要原因,促进其功能恢复,找到新机制通路的靶点,是目前亟待解决的。神经再生是中风后神经功能恢复的重要途径,细胞自噬决定神经干细胞生存和功能,但机制不明。气虚血瘀为缺血性中风主要中医证型,益气活血为主要治则。补阳还五汤为益气活血代表方,临床和实验研究（包括本课题组前期研究）均证实其恢复神经功能的确切作用,但机制不明。中医“气血-肾精-脑髓”与神经再生密切相关,“气的化生”和细胞自噬密切关联。基于上述,本研究提出假说:脑缺血后神经再生自噬活性改变,影响神经元的生存和功能。补阳还五汤调控神经元自噬,促神经再生,影响其功能。并从整体水平,以MCAO大鼠为模型,经自噬抑制剂、诱导剂干预等手段处理,以行为学评分、Western-Blot、免疫荧光等检测,观察脑缺血后自噬活性改变对神经再生的影响及补阳还五汤的作用,并进一步探讨其机制和靶点。方法:1.补阳还五汤对缺血性中风大鼠脑保护作用研究:模型:longa经典线栓法制作大鼠MCAO模型。分组:SD雄性大鼠随机分为三个大组:假手术组、模型组、补阳还五汤组,三个大组继续分别分为7个亚组0d、1d、3d、5d、7d、10d、12d。检测方法:TTC染色法检测各组大鼠大脑梗死面积。目的:选择补阳还五汤脑保护作用最佳时间点。2.补阳还五汤促进缺血性中风大鼠神经再生作用的研究:分组:将SD雄性大鼠随机分组,分别是假手术组（SHAM）、模型组（MCAO）、补阳还五汤组（BYHWD）、3-甲基腺嘌呤组（3-MA）、雷帕霉素组（RAPA）、补阳还五汤+3-甲基腺嘌呤组（BYHWD+3-MA）、补阳还五汤组+雷帕霉素组（BYHWD+RAPA）、羟氯喹组（HCQ）、羟氯喹+补阳还五汤组（BYHWD+HCQ）。检测时间点:根据实验1所得的最佳时间点。检测方法:使用免疫荧光法检测神经再生相关蛋白脑源性神经营养因子（Brain Derived Neurotrophic Factor,BDNF）和双皮质素（Doublecortin,DCX）的表达。目的:确证补阳还五汤促进缺血性中风大鼠神经再生作用。3.补阳还五汤对缺血性中风大鼠神经干细胞自噬的调控作用研究。分组:SD雄性大鼠随机分组,分别是SHAM组、MCAO组、BYHWD组、3-MA组、RAPA组、BYHWD+3-MA组、BYHWD+RAPA组、HCQ组、BYHWD+HCQ组。检测方法:Western-Blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1（Bcl-2-interacting Myosin-like Coiled-coil Protein1）与LC3-Ⅱ（Ⅱ型微管相关蛋白1轻链3,Microtubule-associatedprotein 1 lightchain 3Ⅱ）蛋白的表达。目的:确证补阳还五汤对缺血性中风大鼠神经干细胞自噬的调控作用。结果:1.补阳还五汤对缺血性中风大鼠的脑保护作用:模型组与假手术组相比脑梗死明显;补阳还五汤组与模型组相比,脑梗死明显减少;最佳作用时间点为:缺血再灌注5 d后。2.补阳还五汤促进神经再生作用:BDNF表达:补阳还五汤组与模型组相比,大鼠大脑BDNF表达上调;雷帕霉素组与模型组相比,BDNF表达也上调;补阳还五汤组+雷帕霉素组与补阳还五汤组相比,BDNF表达上调;补阳还五汤组+雷帕霉素组与雷帕霉素组相比,BDNF表达也上调;3-甲基腺嘌呤组及羟氯喹组与模型组相比,未见明显差异;补阳还五汤+3-甲基腺嘌呤组及补阳还五汤+羟氯喹组与补阳还五汤组比,未见明显调控作用。DCX表达:补阳还五汤组与模型组相比,大鼠大脑DCX表达上调;雷帕霉素组与模型组相比,DCX表达也上调;补阳还五汤组+雷帕霉素组与补阳还五汤组相比,DCX表达上调;补阳还五汤组+雷帕霉素组与雷帕霉素组相比,DCX表达上调;3-甲基腺嘌呤组及羟氯喹组与模型组相比,未见明显差异;补阳还五汤+3-甲基腺嘌呤组及补阳还五汤+羟氯喹组与补阳还五汤组比,未见明显调控作用。3.补阳还五汤调控神经干细胞自噬:模型组与假手术组相比,自噬相关蛋白Beclin-1与LC3-Ⅱ蛋白表达上调;补阳还五汤组与模型组相比,Beclin-1与LC3-Ⅱ蛋白表达上调;雷帕霉素组与模型组相比,Beclin-1与LC3-Ⅱ蛋白表达上调;3-甲基腺嘌呤组与模型组相比,Beclin-1与LC3-Ⅱ蛋白表达下调;羟氯喹组与模型组相比,Beclin-1与LC3-Ⅱ蛋白表达下调;补阳还五汤组+雷帕霉素组与补阳还五汤组相比,Beclin-1与LC3-Ⅱ蛋白表达上调;补阳还五汤+3-MA组及补阳还五汤+HCQ组与补阳还五汤组比,未见明显调控作用差异。结论:1.补阳还五汤预处理及后续治疗对缺血性中风大鼠大脑有保护作用。2.补阳还五汤可上调缺血性中风大鼠大脑神经再生相关蛋白BDNF、DCX表达,有促进神经再生的作用,并提示补阳还五汤的促神经再生作用与其对自噬的调控有关。3.补阳还五汤可上调缺血性中风大鼠大脑自噬相关蛋白Beclin-1与LC3-Ⅱ表达,促进自噬,可能是其促进神经再生的主要机制和靶点。4.补阳还五汤可能通过调控自噬促进缺血性中风大鼠大脑神经再生。