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背景与目的：胃癌是中国乃至亚洲的主要癌症致死原因之一。血管新生是肿瘤侵袭、转移的重要过程，因此阻断肿瘤血供、抑制肿瘤血管新生是控制肿瘤生长和转移的重要途径之一。近年，人们发现microRNA在肿瘤的发生、发展及预后中起着重要的作用，同时发现其与肿瘤血管新生、远处转移及肿瘤分期有着密切的联系。有研究表明，miR-126在胃癌组织中低表达，且与患者的预后相关。我们通过生物学软件预测，miR-126与血管内皮生长因子A（Vascular endothelial growthfactorA, VEGFA）存在互补结合序列，双荧光素酶实验证实miR-126可靶向结合VEGFA。众所周知，VEGF家族通过调控肿瘤的脉管新生在肿瘤的生长和转移中扮演着重要的角色，尤其是VEGFA在肿瘤血管新生中发挥重要作用。我们研究拟通过建立稳定的miR-126过表达和抑制表达的SGC-7901细胞系，并通过荷瘤鼠动物实验，分析miR-126与VEGFA之间的关系，进一步明确miR-126的表达与胃癌血管新生的关系。方法：1、根据miR-126的基因序列，设计过表达及抑制表达miR-126慢病毒载体，由上海吉凯基因（GENECHEM）构建完成。将SGC-7901细胞分为5个实验组：miR-126组（过表达miR-126），Control-1组（过表达miR-126对照组），Inhibit组（抑制表达miR-126），Control-2组（抑制表达miR-126对照组），SGC-7901组（空白对照组）。通过慢病毒转染SGC-7901，经过嘌呤霉素筛选之后，获得转染细胞，并通过实时荧光定量PCR检测miR-126的含量，Western Blot检测相关蛋白VEGFA表达，建立稳定的细胞系，MTT检测细胞增殖活性。2、将稳定表达miR-126的SGC-7901接种到裸鼠皮下，观察成瘤情况并测瘤重，计算抑瘤率；免疫组化检测VEGFA及CD34的表达。结果：1、miR-126慢病毒载体转染GC细胞，经嘌呤霉素筛选之后，荧光定量PCR检测显示miR-126组的miR-126表达量明显高于SGC-7901组及Inhibit组（P<0.01），另外，Inhibit组的表达量明显低于SGC-7901组（p<0.05）。2、miR-126对VEGFA表达的影响：根据Western Blot蛋白灰度比较，miR-126抑制表达组VEGFA的表达量较过表达组和空白组高，且是过表达组的2.9倍（P <0.01）。3、MTT检测细胞增殖：过表达miR-126GC细胞增殖受到抑制，24小时抑制明显，抑制miR-126表达，细胞增殖较过表达及空白组升高（p<0.05）。4、miR-126对裸鼠成瘤的影响：miR-126过表达组、miR-126抑制表达组、SGC-7901对照组的平均瘤重分别为：0.57±0.21g，2.79±0.31g，2.01±0.34g，抑制表达组瘤重明显高于过表达组和正常对照组（p<0.01或<0.05）。5、免疫组化检测各实验组中VEGFA及CD34表达：VEGFA在细胞质中表达，呈染色呈淡黄色至棕褐色。抑制表达组VEGFA呈高表达，过表达组及空白对照组表达较抑制表达组低，有统计学差异（P <0.05）。miR-126过表达组、miR-126抑制表达组、SGC-7901对照组的微血管密度（MVD）分别为：20.25±3.39，52.00±4.47，30.35±3.34。抑制miR-126表达的MVD较过表达组及空白对照组高，且明显高于过表达组（P<0.01）。结论：在胃癌中，miR-126可负向调控VEGFA的表达，从而进一步调控胃癌的血管新生。