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我国拥有十分丰富的地方鸡种种质资源,素以肉汁细嫩、肉味香浓等特性而著称于世。山东省地方鸡种种质资源是我国畜禽品种资源的重要组成部分,这些地方畜禽品种的遗传多样性是未来畜禽品种改良的遗传基础。在畜禽肉制品中,谷氨酸钠盐和肌苷酸是主要鲜味物,目前世界上已有不少国家以肌苷酸的含量作为肉类风味以及新鲜程度的衡量指标。 畜禽肉类风味特性属于数量性状,有些数量性状基因座位(QTL)具有较大的效应,甚至是主效基因。影响肌苷酸(IMP)生成及其含量的基因都是影响肌肉风味特性的候选基因。本研究以山东省四个重要地方鸡种寿光鸡、济宁百日鸡、莱芜黑鸡和琅琊鸡为研究对象,选用肌苷酸合成途径中催化最后三步反应的关键酶基因ADSL与ATIC基因作为控制鸡风味特性性状的候选基因。通过分析其对肌苷酸合成酶系以及嘌呤核苷酸循环酶系活力的影响,确定影响鸡肉肌苷酸含量的主效基因,以期能找到不同鸡种之间肌苷酸含量差异的根源,为鸡肉风味特性性状的分子标记辅助选择提供依据。 腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)是催化嘌呤核苷酸的从头合成与嘌呤核苷酸循环的双功能酶。本研究发现在ADSL基因cDNA全序列共出现17处碱基有差异,其中8处为错义突变,并无碱基缺失与插入现象(Indel)发生。济宁百日鸡中存在两个碱基错义突变造成的氨基酸残基的替换,可能影响ADSL的活性,其中T340C碱基突变造成的C114R氨基酸残基替换恰好位于延胡索酸超家族三个高度保守区域的1区,而且距离与AMP结合的残基His108很近,可能会影响到AMP与ADSL的结合;A887G碱基突变造成的K296R氨基酸残基替换恰好位于延胡索酸超家族高度保守的基元内,该基元涉及与底物SAICAR和延胡索酸盐的结合,K296R氨基酸残基替换必然会影响济宁百日鸡ADSL酶的活性。 通过分析各鸡种ADSL基因5′侧翼调控区的差异,发现寿光鸡ADSL基因5′侧翼调控区-27bp处发生C→T突变,使得本来不是NRF-2(核呼吸因子2)结合位点的CTCC突变为NRF-2结合位点CTTC,而且在-18bp处具有另外一个潜在的NRF-2结合位点。-27bp发生的C→T突变与人类ADSL基因调控区第一个NRF-2结合位点发生突变导致ADSL缺陷的位置非常相似。寿光鸡这两个潜在的NRF-2结合位点在嘌呤核苷酸生物合成途径的基因调控上可能起