溃疡性结肠炎患者血清色氨酸及其代谢轮廓分析的研究

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溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis, UC)是一种累及结肠和直肠的慢性炎症性疾病。长期的证据显示:UC是遗传易感人群对共生菌群过度或不足的肠道粘膜免疫反应的结果。迄今为止,发病机制仍不明确,无特异性和敏感性强的诊断标志物,缺乏临床诊断金标准。该疾病目前的治疗目标为诱导并维持临床缓解及粘膜愈合,防治并发症,改善患者生存质量,但治疗效果不甚满意。因此,UC在发病机制、诊断和治疗方面成为研究热点问题。最近有证据表明氨基酸在保持肠道健康中发挥了重要生物学作用,其中代表性氨基酸——色氨酸(L-tryptophan,Trp)是人体必需氨基酸,其代谢与免疫相关,当Trp代谢发生改变时可能会导致消化功能紊乱,如炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)、肠易激综合征(irritable bowel syndrome, IBS)、乳糜泻、憩室炎。因此研究UC患者血清Trp及其代谢产物可能为解决UC的这些热点问题打开新的思路。实验中,我们选取40个个体的血清样本,其中包括20个UC患者(活动期和缓解期)的血清和20个健康志愿者(Healthy volunteers,HVs)的血清。每个UC患者的诊断均基于临床表现、内镜检查、组织学检查及影像学检查综合情况。疾病分型依靠蒙特利尔分类法,活动性分型依靠改良的梅奥指数评估。利用LC-MS/MS的方法检测血清Trp及其主要代谢产物。用单因素方差分析比较UC活动期患者,UC缓解期患者以及HVs中血清Trp之间的差异,用t检验的方法比较UC患者和HVs中血清Trp及其主要代谢产物的差异。两种检测物之间的相关性利用Spearman相关性分析法分析。血清Trp检测和分析结果显示:1.活动期UC患者血清Trp水平显著低于缓解期UC患者和HVs (P<0.05),缓解期UC患者组与HVs无明显差异;2.活动期UC患者血清Trp与ESR呈负相关(r=-0.520*, P=0.024),活动期UC血清Trp与CRP呈负相关(r=-0.523*, P=0.016);3.活动期UC患者经常规治疗进入缓解期后,血清Trp水平有所提高(P<0.05)。Trp代谢物检测和分析结果显示:UC活动期患者的血清Trp代谢轮廓与HVs相比,黄尿酸(XA)、3-羟基-2-氨基丙甲酸(HAA)、5-羟色胺、吲哚-3-乳酸(ILA)、吲哚-3-丙酸(IPA)明显减低。邻氨基苯甲酸(AA)、5-羟基-吲哚-3-乙酸(HIAA)明显升高。其中差异最明显的是黄尿酸。本实验不仅对UC患者(包括活动期和缓解期)与健康志愿者(HVs)血清Trp进行了定量分析,探讨了血清Trp水平在UC疾病进展过程中可能的作用和临床意义。同时还利用了2011年,朱文涛教授改进的液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)定量检测了UC活动期患者与HVs血清Trp的关键代谢产物,这些关键代谢产物分别来自Trp代谢中的犬尿氨酸途径、5-羟色胺途径以及细菌分解途径。这也是目前为止在UC患者中最完整的血清Trp代谢轮廓分析。通过全面的分析比较UC活动期患者与HVs血清Trp代谢情况,我们1.发现了UC活动期患者与HVs血清Trp不同代谢途径中Trp代谢产物的差异,其中差异最明显的的代谢产物为黄尿酸,为今后的进一步研究奠定了基础;2.了解了UC活动期患者血清Trp整体的分解代谢情况及关键代谢产物在UC发病机制中可能发挥的作用,为更好的了解UC的发病机制,寻找特异性诊断标志物及靶向治疗方法提供了参考价值。
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