论文部分内容阅读
冷应激是我国寒冷地区畜牧业面临的最普遍的一种环境气候逆境因素,严重影响着畜禽健康发展。本研究以30日龄断奶仔猪为研究对象,旨在探讨急性冷暴露对仔猪血液代谢指标及部分免疫指标的影响。选取体况相近健康断奶仔猪16头,随机分为常温对照(Normal temperature,NT)组、冷暴露2 h(Cold exposure 2 h,CE2h)组、冷暴露6 h(CE6h)组和冷暴露12 h(CE12h)组,每组4头。NT组饲养温度为24±2℃,CE组饲养温度为4±2℃。通过检测不同冷暴露时间断奶仔猪动脉血电解质与血气参数以及血清皮质醇(CORT)的水平变化,来评估断奶仔猪的应激状态。结果显示,断奶仔猪动脉血pH无显著变化(P>0.05),二氧化碳分压(PCO2),二氧化碳总量(tCO2),碳酸氢根离子(HCO3-)在冷暴露12 h期间显示出先下降后恢复的变化趋势,其中tCO2(P<0.05)、HCO3-(P<0.01)在CE6h组显著低于NT组,钠离子(Na+),钾离子(k+),氯离子(Cl-)和阴离子间隙(AnGap)的水平显示出先上升后恢复的变化趋势,Na+(P<0.05),k+(P<0.01),Cl-(P<0.05)和AnGap(P<0.001)在CE6h组显著高于NT组。血清中CORT水平显示出先上升后恢复的变化趋势,在CE6h组显著高于NT组(P<0.01)。这些结果表明,冷暴露6 h诱导断奶仔猪体内酸碱失衡,血清CORT水平升高,断奶仔猪急性冷暴露模型构建成功。为探究急性冷暴露对断奶仔猪血液代谢指标的影响,通过生化分析、ELISA试剂盒来检测断奶仔猪血液中代谢产物葡萄糖(Glu)、总蛋白(TB)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)、钙(Ca)、无机磷(P)、总胆红素(TBil)、甘油三酯(TG)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、淀粉酶(AMY)、花生四烯酸(AA)和谷氨酰胺(GLN)的水平变化。结果显示,Glu、Cr、CK的水平在冷暴露12 h期间显示出先下降后恢复的变化趋势,Cr(P<0.05)、CK(P<0.01)在CE6h组显著低于NT组;TB、ALB、GLO、P、TBil、TG、AA和GLN的水平显示出先上升后恢复的变化趋势,TB(P<0.001)、ALB(P<0.01)、GLO(P<0.01)、P(P<0.001)、TBil(P<0.05)、TG(P<0.01)、AA(P<0.01)和GLN(P<0.05)的水平在CE6h组显著高于NT组;BUN、Ca、AST、ALT、AMY的水平无显著性变化(P>0.05)。这些结果表明,急性冷暴露可引起断奶仔猪血清中Glu、TB、ALB、GLO、Cr、P、TBil、TG、CK、AA和GLN水平明显的改变。为探究急性冷暴露对断奶仔猪血液部分免疫指标的影响,通过ELISA试剂盒和qRT-PCR来检测血液中免疫球蛋白、炎性细胞因子以及应激蛋白HSP70的水平变化。结果显示,IgG和IgM的水平无显著性变化(P>0.05)。炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-6 mRNA水平显示出先上升后恢复的变化趋势,在CE6h组显著高于NT组(P<0.001);IL-10 mRNA水平显示出先下降后恢复的变化趋势,在CE6h组显著低于NT组(P<0.001)。热休克蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)mRNA水平显示出先上升后恢复的变化趋势,在CE2h组和CE6h组极显著高于NT组(P<0.001)。表明急性冷暴露可引起断奶仔猪全血中炎性细胞因子TNF-α,IL-6,IL-10以及应激蛋白HSP70mRNA水平发生变化。结论:断奶仔猪急性冷暴露模型构建成功;急性冷暴露可引起断奶仔猪血清中Glu,TB,ALB,GLO,TBil,Cr,CK,TG,P,AA和GLN水平明显的改变,全血中炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10和应激蛋白HSP70 mRNA的表达发生显著的变化,使机体在糖代谢、脂质代谢、蛋白质代谢、氨基酸代谢和能量稳态等方面存在多种调节,同时激活固有免疫来维持机体稳态平衡。