背景和目的：静脉注射免疫球蛋白（IVIG）应用于临床上已经有四十多年的历史，大剂量地注射IVIG目前在临床上主要适用于治疗原发性或继发性的免疫缺陷疾病，其副作用极小，已经被临床证实为安全药物。近年来有研究发现，恶性肿瘤与自身免疫疾病常常共存在患者体内，且有临床研究发现IVIG在治疗免疫缺陷疾病的同时，对共存在患者体内的肿瘤也具有一定的抑制作用。有研究报道在黑色素瘤、肉瘤、直肠癌等肿瘤动物模型中，肿瘤细胞系以及肿瘤患者身上应用IVIG能够对肿瘤的生长和转移起到一定的抑制作用，但至今仍没有系统的研究数据或报告。对于IVIG的作用机理已有很多研究，但关于IVIG抑制肿瘤的作用机制却很少有报道，且至今仍没有统一公认的理论，Carmine等于2015年5月在Nature杂志上发表论文，认为外源性IgG可能与肿瘤抗原结合，使树突状细胞能够吞噬这些抗原，进而激活T淋巴细胞，杀灭肿瘤细胞。目前看来，IVIG很可能同时通过多种机制和通路发挥作用。本研究的目的在于研究小鼠IVIG对黑色素瘤在C57BL/6小鼠体内肺转移的预防及治疗作用，并且探讨IVIG发挥抑制肿瘤生长和转移作用的可能性机制。　　材料与方法：　　1.材料：　　1.1 实验动物：7-8周龄C57BL/6雌鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司,饲养于汕头大学医学院实验动物中心SPF级动物实验室。　　1.2 细胞：小鼠黑色素瘤细胞系B16F10购自武汉普诺赛（Procell）生命科技有限公司；小鼠巨噬细胞系RAW246.7购自上海歌凡生物科技有限公司，两种细胞均培养于含10％胎牛血清的DMEM培养基中，在含5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。　　1.3 实验试剂：小鼠IgG干粉购自北京索莱宝科技有限公司，保存于-20℃冰箱中，现用现溶解；Cell Counting Kit CCK-8细胞增殖活性检测试剂盒购自上海翊圣生物科技有限公司，避光保存于4℃冰箱中；ELISA试剂盒购自北京四正柏生物科技有限公司，保存于4℃冰箱中；Mouse Cytokine Array Kit小鼠细胞因子蛋白质芯片购自美国R＆D公司，保存于4℃冰箱中。　　2.银染：将小鼠IgG干粉用PBS缓冲液溶解后，热变性，SDS-PAGE电泳，再利用硝酸银染色技术对蛋白条带进行染色，以此鉴定小鼠IgG纯度。　　3.小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建：对C57BL/6小鼠尾静脉注射B16F10黑色素瘤细胞，注射的细胞数量包括1.5×105，2.5×105,4×105。正常情况下15天左右肿瘤开始转移到肺。通过在接种肿瘤前后对小鼠给予尾静脉注射小鼠IVIG来分别建立预防模型和治疗模型。　　4.生存期分析：对C57BL/6小鼠尾静脉注射1.5×105个B16F10细胞，通过在接种肿瘤前后对小鼠给予尾静脉注射小鼠IVIG来分别建立预防模型和治疗模型，然后统计小鼠的累积生存率。　　5.免疫组织化学染色：检测黑色素瘤肺转移小鼠肺脏组织中gp100和ki67的表达，以此判断IVIG对黑色素瘤肺转移及其恶性程度的影响。　　6.免疫组化打分：对ki67抗体染色的小鼠肺组织切片，于400×镜下随机选取5个视野进行观察，统计计算ki67的标记指数（LI）即阳性率，作为判断黑色素瘤肺转移的恶性程度的标准之一。LI=(p/t)×100％(p：阳性细胞数，t：总细胞数)。　　7.细胞增殖活性检测实验：用经IVIG刺激过后的小鼠巨噬细胞上清液去刺激黑色素瘤细胞，再利用Cell Counting Kit CCK-8细胞活性检测试剂盒检测黑色素瘤细胞的增殖活性。　　8.免疫酶联分析实验（ELISA）：用不同浓度的IVIG去刺激小鼠巨噬细胞RAW246.7，再利用ELISA方法检测小鼠巨噬细胞上清中TNF-α、IL-6、IL-12的水平，以此鉴定IVIG对小鼠巨噬细胞炎性因子分泌的影响。　　9.蛋白质芯片技术：采用高通量的蛋白质芯片技术，利用Mouse Cytokine Array Kit小鼠细胞因子蛋白芯片检测IVIG对小鼠巨噬细胞炎性因子分泌的影响。　　结果：　　1.银染结果显示：实验中所用小鼠IVIG由重链和轻链组成，无明显的其他蛋白条带。　　2.IVIG在预防实验鼠和治疗实验鼠中明显抑制黑色素瘤肺转移。　　3.经IVIG预防或治疗的黑色素瘤肺转移小鼠生存期明显延长。　　4.经IVIG预防或治疗的小鼠肺组织中gp100和ki67阳性率明显低于对照小鼠。　　5.经IVIG刺激的小鼠巨噬细胞RAW246.7上清明显抑制B16细胞的增殖活性。　　6.IVIG刺激小鼠巨噬细胞RAW246.7分泌TNF-α、IL-6、IL-12、G-CSF、GM-CSF、IL-1α、IL-1ra、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2、C5/C5a，同时抑制其分泌Eotaxin、IP-10、sICAM-1、IL-10。　　结论：尾静脉注射小鼠IVIG对黑色素瘤细胞在C57BL/6小鼠体内的肺转移具有预防和治疗的作用，IVIG发挥该作用的机制可能是：IVIG刺激小鼠巨噬细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-12、IL-1α、IL-1ra、MIP、C5/C5a等促炎因子，抑制小鼠巨噬细胞分泌sICAM-1、IL-10等炎症或免疫抑制因子，从而通过这些细胞因子直接或间接地杀伤肿瘤细胞，抑制肿瘤细胞的生长及转移。