【摘 要】
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纳豆激酶(Nattokinase, NK)是一种碱性丝氨酸蛋白酶,能显著地溶解体内外的血栓,它由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilis var.natto)产生,最早从纳豆中分离得到。国内外大量研究
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纳豆激酶(Nattokinase, NK)是一种碱性丝氨酸蛋白酶,能显著地溶解体内外的血栓,它由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilis var.natto)产生,最早从纳豆中分离得到。国内外大量研究证实了纳豆激酶的医用价值,但由于获取成本过高,所以应用基因工程途径获取纳豆激酶是近年来的研究热点。本研究从纳豆芽孢杆菌中,利用PCR技术扩增并获取了纳豆激酶基因,构建了表达载体pPICZaC-NK,建立了重组NK毕赤酵母真核表达系统。通过对产物进行SDS-PAGE分析和四肽底物法活性分析,筛选获得了高表达纳豆激酶的毕赤酵母菌株,并对其最佳发酵条件进行初步探索,明确了发酵时间以及不同pH等对其发酵的影响,进行了大规模发酵纯化工艺研究,为重组纳豆激酶的工业化生产奠定了基础。
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