【摘 要】
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目的：以TGF-β1诱导A549细胞出现上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT),探讨EMT过程的信号转导途径对肺纤维化发病机制的意义。方法：体外培养A549细
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目的：以TGF-β1诱导A549细胞出现上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT),探讨EMT过程的信号转导途径对肺纤维化发病机制的意义。方法：体外培养A549细胞,以TGF-β15ng/ml进行干预,收集不同时段的细胞,用荧光实时定量PCR检测上皮及间质细胞标志物的mRNA在0h、1h、3h、6h、12h和24 h的表达水平,Westernblot检测上皮及间质细胞的标志物在0h、3h、6h、12h、24h、48h和72h的表达水平,以及信号转导蛋白P-Smad 2／3、Snail1、Snail2在0h、24h、48h的表达水平,应用倒置相差显微镜观察TGF-β1干预前后细胞形态学的变化,并在0h、24h、48h照相记录。结果：TGF-β15ng/ml干预后,A549细胞上皮细胞标志物的mRNA和蛋白表达随着时间延长总体下调(P<0.05),间质细胞标志物的mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)；信号转导蛋白P-Smad 2/3、Snaill上调(P<0.05),snail2弱表达(P>0.05)；倒置相差显微镜观察到TGF-β1干预后A549细胞由鹅卵石状变为梭形,形态如同肌纤维母细胞。结论：TGF-β1可以在体外诱导肺泡上皮细胞向间质细胞转化,其机制与Smad 2/3、Snail1信号转导途径相关,提示肺泡上皮细胞向间质细胞的转化是肺纤维化发生的直接原因,而Smad 2/3、Snaill信号转导途径很可能是关键环节。通过诱导或促进肺泡上皮细胞向间质细胞转化,可以促使肺纤维化的发病,而通过阻断这一过程及其下游的信号转导通路有望治疗肺纤维化。
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