FR180204对PCOS患者卵巢颗粒细胞ERK丝氨酸磷酸化及GLUT-4蛋白表达的影响

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目的:检测细胞外信号调节激酶(Extracellular signal regulates kinase,ERK)蛋白激酶抑制剂FR180204对多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者卵巢颗粒细胞ERK丝氨酸磷酸化及葡萄糖转运蛋白-4(Glucose transporters-4,GLUT-4)蛋白表达的影响,从分子水平探讨PCOS的发生机制。方法:收集行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的PCOS患者和非PCOS患者取卵当日卵泡液各20份,分离纯化得到黄素化颗粒细胞。将PCOS患者每份细胞样本一分为二,置于2个培养瓶中分别进行培养,其中一组培养液中添加FR180204为研究组,即PCOS+IN组(n=20);另一组不添加FR180204,作为PCOS组(n=20)。非PCOS患者的黄素化颗粒细胞进行培养作为对照组,即N-PCOS组(n=20)。采用Western blot方法对各个组别颗粒细胞中的ERK丝氨酸磷酸化进行测定,并分析GLUT-4蛋白的表达程度。结果:(1)PCOS组与非PCOS组在年龄、不孕年限、体重指数、基础雌二醇、卵泡刺激素、泌乳素、Gn启动量、Gn总用量方面比较,差异均无统计学意义(t值分别为0.000,1.870,0.828,1.480,0.099,0.261,1.376,0.924,均P>0.05);相比于N-PCOS组,PCOS组有较高的基础促黄体生成激素、睾酮水平以及获卵数量,差异均有统计学意义(t值分别为7.582,4.577,2.330,均P<0.05)。(2)三组患者ERK丝氨酸磷酸化及GLUT-4蛋白表达量比较均具有统计学差异(F值分别为36.773,593.955,均P<0.05);相比于对照组,PCOS组的ERK丝氨酸磷酸化明显较高,但是其GLUT-4蛋白的表达程度较低(P<0.05);FR180204处理后ERK丝氨酸磷酸化明显降低,GLUT-4蛋白表达量仍较N-PCOS组低,但较FR180204未处理组表达量高(P<0.05)。结论:(1)FR180204在降低ERK丝氨酸磷酸化的同时还能够在一定程度上促进颗粒细胞中GLUT-4蛋白的表达;(2)胰岛素的两条信号通路之间存在相互联系,FR180204通过降低ERK丝氨酸磷酸化,可抑制MAPK/ERK通路活性,从而使得卵巢颗粒细胞中PI3K通路的活性得到一定的提升,进而促进下游蛋白GLUT-4的进一步表达;(3)PCOS的发生与MAPK/ERK通路异常激活密切相关。
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