艾灸对脑缺血后脑神经损伤修复的作用及相关机理研究

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目的:探讨艾灸任脉经穴对脑缺血大鼠脑组织超微结构、ERK信号通路和神经干细胞增殖分化的影响。方法:将成年健康雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸任脉组(MR)。正常组8只,其余各组分别随机分为7天、14天和28天三个亚组,每亚组8只。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型;运用电镜观察比较7天假手术亚组大鼠、7天MCAO亚组大鼠及7天艾灸任脉经穴亚组MCAO大鼠纹状体和海马的超微结构变化,运用Western Blot测定MCAO大鼠缺血侧脑室下区、海马齿状回ERK的表达及其磷酸化水平;运用免疫荧光、激光共聚焦显微镜及荧光显微镜观察缺血侧脑室下区BrdU阳性细胞和BrdU/Nestin双标细胞的表达、缺血海马齿状回GFAP阳性细胞和GFAP/NSE双标细胞的表达。结果:1、与同期(脑缺血后七天)MCAO大鼠相比,艾灸任脉经穴治疗能改善局灶性脑缺血大鼠脑组织超微结构。2、与MCAO大鼠相比,艾灸任脉至少在MCAO的14天后可促进缺血侧脑室下、缺血海马齿状回ERK1/2的表达,并至少在MCAO后的第7天就可以显著提高缺血侧脑室下、缺血海马齿状回ERK1/2的磷酸化水平,提示应用艾灸任脉能激活局灶性脑缺血缺血侧脑室下、缺血海马齿状回的ERK通路,对细胞的生长分化产生影响。3、艾灸任脉可以使得缺血侧脑室下BrdU阳性细胞和BrdU/Nestin双标细胞明显增加。提示艾灸任脉治疗对缺血侧脑室下神经干细胞增殖的有促进作用。4、艾灸任脉经穴治疗可以下调脑缺血后海马齿状回的GFAP阳性细胞数,同时使GFAP/NSE双标细胞增多,提示艾灸任脉经穴治疗使缺血海马GFAP/NSE双标细胞增加的同时,可以调节脑缺血后缺血海马GFAP的表达,说明艾灸任脉经穴治疗可抑制脑缺血后海马星形胶质细胞的过度增殖并可促进细胞分化。结论:艾灸任脉经穴治疗能改善局灶性脑缺血大鼠脑组织超微结构,艾灸任脉经穴能激活MCAO大鼠ERK信号转导通路,并能促进MCAO大鼠神经干细胞增殖与分化。
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