Kallikrein是一类编码丝氨酸蛋白酶的基因家族,该家族由15个成员组成。该家族多数成员的表达与激素依赖相关型肿瘤密切联系,暗示了它们与作为前列腺癌临床生物学标志的前列腺特异性抗原PSA(hK3)一样,具有生物学标志潜力。KLK6是该基因家族成员之一,编码丝氨酸蛋白酶(hK6),据报道KLK6与性激素依赖性器官肿瘤—乳腺癌的发病有关,但参与的机制尚不清楚。为此,本课题拟通过siRNA技术来探讨该基因在乳腺癌中的功能。目的:运用siRNA技术探讨KLK6基因在乳腺癌发生发展中的作用。方法:应用乳腺癌细胞株MCF-7建立裸鼠乳腺癌动物模型,体外合成KLK6 siRNA并构建其表达载体,瘤体注射siRNA或其表达载体,探讨siRNA对荷瘤鼠瘤体细胞中KLK6基因的干扰效果及其对瘤体细胞生物学特性的影响。结果:载体介导的siRNA体内抑制了人乳腺癌荷瘤鼠KLK6的表达后,移植瘤生长速度加快,肿瘤细胞S期明显增加,细胞凋亡有下降趋势。结论:本实验运用了载体介导的siRNA技术成功抑制了裸鼠体内人乳腺癌移植瘤中KLK6基因的表达。实时荧光定量PCR检测KLK6 mRNA表达降低、免疫组化检测hK6蛋白表达量明显减少。流式细胞仪分析结果显示,实验组S期细胞明显增多、移植瘤生长速度加快,细胞凋亡有下降趋势。提示KLK6基因在乳腺癌的发生过程中起到抑制作用,为乳腺癌的防治提供了新思路。