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农业上面临着各种真菌性病害的危害,从而导致经济的损失。传统使用的化学农药毒性高、靶标选择性差、环境污染严重、容易诱导产生抗性,从而促使人们研发环境友好型农药,以抗菌肽为代表的新型生物农药正逐渐发展为一个趋势。抗菌肽来源广泛,许多植物中存许多抗菌肽,抗菌肽具有抗菌谱广、稳定性强、不易产生抗性、安全、高效等优点,在工业、农业和畜牧业等领域有很好的应用前景。乌塌菜属于十字花科不结球白菜的变种,在我国有近千年的栽种历史,而对其抗菌肽的研究还未见报道。本文主要从乌塌菜的种子中筛选抗菌蛋白,并对其抗菌机制进行研究。通过Affi-gel blue gel column亲和层析、SP-Sepharose阳离子交换层析、FPLC的Mono S强阳离子交换层析和Superdex 75凝胶层析的方法纯化,从乌塌菜(Braassica campesttris L.ssp.Chinesis(L.)Makino var.rosularis Tsen et Lee)种子纯化出一种 SUP-2抗菌肽,其分子量为 5.7 kDa。该抗菌肽对落花生球腔菌(Mycosphaerella arachidicola)、凸脐蠕孢菌(Exserohilum monoceras)、茄病镰刀菌(Fusarium solanif.sp.glycines)、苹果黑腐皮壳菌(Valsa mali)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、烟草炭疽病菌(Colletotrichum micotianae、长柄链格孢菌(Alternarialongipes)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、玉米小斑病菌(Helminthosporium maydis)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、小白菜炭疽病菌(Colletotrichum higginsianum)、稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)、芭乐炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)和孢粘帚霉(Gliocladium catenulatum)14 种病原真菌有抑制活性,其 IC50分别为 1.46、2.91、3.52、3.98、4.82、5.24、6.51、8.17、11.21、19.38、26.17、50.29、73.68 和 183.49μM。该抗菌肽也抑制病原菌孢子的萌发,500 μM该SUP-2抗菌肽对烟草炭疽病菌孢子、稻瘟菌孢子、玉米小斑病菌孢子、小白菜炭疽病菌孢子和凸脐蠕孢菌孢子的孢子萌发抑制率分别为15.73%、59.49%、87.63%、88.05%、94.10%,其中对凸脐蠕孢菌孢子的EC50为134.06 μM。该蛋白对细菌和肝癌细胞没有抑制活性。总之,上述结果表明,乌塌菜种子中纯化的SUP-2抗菌肽,对病原真菌具有广谱抗性,可作为控制农业上真菌性病害的潜在药物,开发成新型农业使用的生物农药值得开展。