【摘 要】
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目的:通过同背景E2F1基因敲出鼠(E2F1-/-)与野生型老鼠(WT)创面愈合情况的比较,及两组间同一时间段创缘VEGF表达量变化的比较,探索E2F1与创面愈合是否相关。方法:于同背景E2F
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目的:通过同背景E2F1基因敲出鼠(E2F1-/-)与野生型老鼠(WT)创面愈合情况的比较,及两组间同一时间段创缘VEGF表达量变化的比较,探索E2F1与创面愈合是否相关。方法:于同背景E2F1基因敲出鼠(E2F1-/-)与野生型老鼠(WT)背部切取9mm创面,正常饮食,单笼饲养。分别记录不同愈合时段(0天、3天、7天、10天、14天)创面愈合情况,并计算创面愈合率,比较两组创面愈合速度的差别;石蜡包埋HE染色观察并计算E2F1-/-组和WT组皮肤创面真皮厚度的差别;Masson染色观察并统计E2F1-/-组和WT组创面皮肤胶原沉积的情况是否有差别。CD31免疫组织化学染色观察创缘增殖血管的数量;Tunel荧光染色(绿色)+CD31(红色)免疫荧光染色,观察并统计E2F1-/-组与WT组血管凋亡的情况;免疫组织化学染色(CD68,MPO,CD3)观察创面炎细胞(中性粒细胞,巨噬细胞,T细胞)浸润情况。对创缘VEGF免疫组化染色,通过Western blot检测VEGF蛋白表达,通过RT-PCR检测VEGF m RNA的表达,观察VEGF在E2F1-/-组和WT组两组间表达是否有差别。结果:E2F1-/-组创面愈合率明显优于WT组;HE染色后E2F1-/-组真皮厚度明显优于WT组;在对创面组织进行CD31免疫组织化学的染色中,可见E2F1-/-组新生血管数量明显多于WT组;通过Tunel荧光染色(绿色)+CD31(红色)免疫荧光染色,发现E2F1-/-组血管凋亡的较WT组明显减少;而两组间炎细胞浸润并无明显差异;免疫组化,WB,RT-PCR对VEGF的表达量的检测,从组织切片、蛋白表达方面比较,皆发现E2F1-/-组创缘VEGF的表达明显高于WT组,具有统计学意义。结论:在创面愈合中E2F1可能通过抑制VEGF的表达,减少血管生成,进而延缓创面愈合。
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