异补骨脂查尔酮的农药学命名为苯丙烯菌酮,它是从豆科植物补骨脂种子中提取的抑菌活性成分,对苹果腐烂病菌、水稻稻瘟病菌、黄瓜炭疽病菌、番茄炭疽病菌、禾谷镰刀病菌等15种病原真菌均有较好的抑制活性。本实验首先以水稻稻瘟病菌为供试菌,采用紫外分光光度法和荧光分光光度法对细胞壁几丁质水解酶及其合成酶,葡聚糖水解酶及其合成酶进行活性测定,并对两种水解酶相应的水解产物进行含量测定,探究苯丙烯菌酮对水稻稻瘟病菌细胞壁的作用;测定了水稻稻瘟病菌细胞胞外磷物质浓度,PI-DNA复合物荧光强度;采用气质联用方法测定了甾醇类物质含量,进一步解释杀菌剂对菌体细胞膜的影响;然后结合计算机分子模拟技术,对几丁质酶进行同源建模、活性位点预测、几丁质酶动力学分析、几丁质酶与小分子复合物动力学分析、分子对接和结合自由能计算等工作探究杀菌剂与几丁质酶的相互作用;最后通过SDS-PAGE蛋白凝胶电泳试验观察苯丙烯菌酮对菌体内蛋白生成及含量的影响。通过以上研究得出以下结论:苯丙烯菌酮可以调节细胞壁几丁质酶、葡聚糖酶及其合成酶的活性,并以氢键方式与几丁质酶的ASP267和ARG276残基结合,与TYR270,PRO271,VAL272,LEU310,PRO311,TYR316和LEU317这些非极性的氨基酸残基形成重要的疏水作用,破坏了细胞壁的结构和功能;细胞膜相关实验表明苯丙烯菌酮处理组,菌体细胞膜的流动性和完整性遭到破坏,加速了细胞凋亡进程;蛋白电泳结果也显示细胞内蛋白的种类和数量发生了相应的变化。通过以上研究为新型杀菌剂的开发提供思路。