论文部分内容阅读
趋化因子是一大类细胞因子，它与白细胞上的受体结合，激活受体传导信号，使白细胞产生趋化运动，在淋巴细胞的再循环，慢性炎症反应、过敏性疾病、自身免疫性疾病、抗感染、抗肿瘤以及AIDS的防治等方面都有重要的作用，具有极大的药用价值。到目前为止已发现的趋化因子有50多种，其分子量在8-12Kda左右。 趋化因子的分子结构上具有很高的同源性，均含有4个保守性的半胱氨酸(Cys)，形成特征性的链内二硫键，根据这四个半胱氨酸的位置关系，可将趋化因子家族又分为α和β两个亚家族，两个亚家族激活不同的白细胞亚群，具有明显的选择特异性。α亚家族如IL-8、NAP-1、NAP-2等，主要激活中性粒细胞。β亚家族如MCP-1、MCP-2、Rantes、MIP-1α等，主要激活单核吞噬细胞和／或T淋巴细胞。 目前国内外关于趋化因子的研究多集中于体内趋化因子结构和功能的研究，从体外天然蛋白中筛选趋化因子的工作鲜有报道。蛇毒中的某些组分与趋化因子功能相似，都具有体内溶血，体外凝血的作用，其受体也与趋化因子受体相同，均为G蛋白偶联受体，因此可能其中含有某些趋化因子或趋化因子类似物。我们在分子水平上建立趋化因子的筛选体系，从十二种国内外蛇毒中分离、纯化出409个分子量与趋化因子相近的小肽，并以之为样品库，用趋化小室和细胞微生理检测仪(Cytosensor)对它们进行筛选，从中寻找趋化因子诱导物及新的趋化因子。经趋化小室和Cytosensor两步筛选均具活性的样品再通过体外细胞毒试验，去除有细胞毒的成分，初步得剑蝰蛇蛇毒成分中的knis2-2、knis3-5、knis3-6三个军事医学科学院硕卜研究生毕业论文具有趋化活性的成分。通过Cyt、〕、。f1So:、实验分别少TJk:、i、2一2、kniS3一5、kni、:3一6与趋化囚r不同亚族的代表!卜一8((:XC族)和而:，te、((:C族)相互作用，竞争结合受体，发现这几种活性成分与Cx(:族趋化因子II，一8不存在竞争关系，两者共同作用细胞后，表现出趋化能力的叠加关系，而与CC族趋化因子RanteS共同作用细胞受体后，则表现出对尺ant。、趋化能力的明显的竞争抑制。初步证明蛙蛇蛇毒中的这三个趋化活性成分可能属于CC族趋化因子，有待于进一步实验的验证。