【摘 要】
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目的:秦七风湿方水提液作为一个整体,采用不同的现代分离技术(大孔树脂分离技术、膜分离技术),获得各分离单元苷类物质提取物,以此为研究对象,开展物理化学参数及共性高分子的测定,阐
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目的:秦七风湿方水提液作为一个整体,采用不同的现代分离技术(大孔树脂分离技术、膜分离技术),获得各分离单元苷类物质提取物,以此为研究对象,开展物理化学参数及共性高分子的测定,阐明分离技术对秦七风湿方的物理化学表征参数之间的影响具有相关性,且初步筛选较优分离技术。 方法:1、提取工艺:采用单因素筛选结合中心组合试验设计,以指标性成分的加权综合评分为评价指标,优选最佳提取工艺。2、大孔树脂分离,其主要流程是以醇沉法、明胶沉淀法以及大孔树脂吸附法。分别以指标性成分的加权综合评分和指标性成分的比吸附量及比洗脱量作为评价指标来考察实验各因素,来确定工艺参数。3、膜分离,其主要流程是离心法以及膜分离法,以膜通量及指标性成分的综合转移率为评价指标考察实验各因素,最终确定工艺参数。4、对各分离单元从PH、电导率、浊度、黏度、相对比重五个方面的物理参数表征进行研究。5、以各分离单元中蛋白质、鞣质、果胶、淀粉四种共性高分子,分别采用考马斯亮蓝G-250比色法、皮粉法、重量法、酶水解-高锰酸钾法进行测定;以竹节参皂苷4a、龙胆苦苷、马钱苷为指标性成分,分别采用HPLC法进行定量研究;同时采用TLC法进行定性研究;通过HPLC指纹图谱技术对各分离单位共有成分的特征进行分析探讨。 结果:1、通过单因素实验考察煎煮时间,加水倍量、煎煮次数对秦七风湿方中各指标性成分含量的影响,确定最佳提取工艺条件为:煎煮时间120min,加水倍量16倍,煎煮3次。2、采用适当的方法和设备去除秦七风湿方提取液中的杂质,提高有效成分的纯度,得出最佳的大孔树脂分离工艺参数:D101型大孔树脂,吸附时树脂与药材的比例为2:1,上样药液浓度为0.2mg/mL,树脂径高比为1:10,上样速度为1BV/h,先用4BV水洗,再用4BV30%乙醇洗脱收集,最后用3BV95%乙醇洗脱收集。3、出于节时、节能并能最大限度的保留秦七风湿方水提液的有效成分的目的,最终选择了操作条件为:膜孔径为0.2μm,操作压力为0.35MPa,药液生药浓度为0.1g/mL,在30℃的温度下进行过膜。4、不同分离技术对秦七风湿方水提液物理化学参数的之间影响具有相关性,且初步筛选出膜分离为较优分离技术。 结论:本文研究表明,采用不同的现代分离技术(大孔树脂分离技术、膜分离技术)对秦七风湿方中物理化学表征参数之间的影响具有相关性,且初步筛选膜分离较优。
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