南方鲇、鲫鱼和团头鲂不同组织线粒体对底物利用的比较研究

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由于物种间的能量代谢模式及其线粒体代谢机制存在差异,同一动物体内的不同器官也具有特定的生理功能和能量需求,因此当呼吸底物种类发生变化时,各物种和各组织对底物的代谢水平也存在差异,而有关不同组织线粒体代谢功能的比较研究,多数是在某种单一底物条件下进行的,不同研究者选用的底物类型存在差异,在该种情况下很难准确评估线粒体的代谢功能,因此选择适宜的底物是客观比较不同物种以及不同组织间线粒体代谢功能差异的前提条件。本研究以南方鲇(Silurus meridionalis)、鲫鱼(Carassius auratus)和团头鲂(Megalobrama amblycephala)为研究对象,分别在复合体Ⅰ-型底物(丙酮酸+苹果酸和谷氨酸+苹果酸)、复合体Ⅱ-型底物(β-羟丁酸和琥珀酸)4种单一底物以及4种底物按一定浓度配比的混合底物条件下,测定了3种实验鱼的肝(胰)脏、肾脏、心脏、脑和红肌组织的线粒体呼吸率及其细胞色素c氧化酶(CCO)的活性,比较研究了不同底物条件下组织线粒体对底物利用的偏好性,为探讨不同鱼种及不同组织之间线粒体代谢功能的差异的实验研究,提出合适的线粒体代谢底物,并综合评估不同组织之间和不同鱼种之间线粒体代谢功能的差异。本研究得到的实验结果如下:1.以β-羟丁酸为底物的条件下,南方鲇、鲫鱼和团头鲂5种组织线粒体呼吸的RCR值在1.19-2.61之间,即3种实验鱼的5种组织线粒体均不能有效利用β-羟丁酸作为氧化底物。2.在复合体Ⅰ-型底物条件下,3种实验鱼的5种组织线粒体的呼吸偶联效率均高于复合体Ⅱ-型底物。3.除β羟丁酸外,每种实验鱼的心脏线粒体在其它底物条件下的RCR值均大于4,并且与其它组织相比,其呼吸偶联效率相对较高。4.南方鲇、鲫鱼和团头鲂的各组织线粒体的状态3呼吸率均随着底物的种类不同而发生变化,对底物的利用均存在明显的偏好性,不同鱼种的相同组织线粒体对底物的利用偏好也存在差异。5.总体上,3种实验鱼组织线粒体对混合底物均表现出较高的氧化能力,除鲫鱼脑组织线粒体氧化琥珀酸的状态3呼吸率显著高于其在混合底物条件下的该值外(P<0.05),与4种单一底物相比,南方鲇、鲫鱼和团头鲂的各组织线粒体在混合底物条件下的状态3呼吸率均处于相对最高水平。6.在混合底物条件下,相同鱼种的心脏组织线粒体状态3呼吸率均显著高于各自的肾脏、肝(胰)脏、脑和红肌4种组织(P<0.05),鲫鱼和团头鲂的红肌线粒体状态3呼吸率在混合底物条件下分别显著高于其脑、肝胰脏和肾脏(P<0.05),而该指标在每种实验鱼的脑、肝(胰)脏和肾脏之间则差异不显著。7.在混合底物条件下,团头鲂的心脏线粒体状态3呼吸率分别显著高于南方鲇和鲫鱼(P<0.05),鲫鱼心脏线粒体的该指标显著高于南方鲇(P<0.05);红肌线粒体状态3呼吸率在鲫鱼和团头鲂之间无显著差异;3种实验鱼的肝(胰)脏、肾脏和脑组织该指标的相对大小,在混合底物条件下则变动较大。8.除团头鲂的肝胰脏外,南方鲇、鲫鱼和团头鲂的其它组织线粒体在复合体Ⅱ-型底物条件下的状态4呼吸率均显著高于各自在其它单一底物条件下的值(P<0.05);在复合体Ⅰ-型底物条件下,3种实验鱼的各组织线粒体状态4呼吸率则处于较低水平。9.心脏组织中CCO活性最高,其次为红肌,脑、肝(胰)脏和肾脏组织中该种酶活性相对较低。心脏线粒体的CCO活性在不同鱼种间存在较大差异,该指标大小依次为:团头鲂>鲫鱼>南方鲇,统计检验表明,3种鱼之间的CCO活性差异达到显著性(P<0.05)。本研究主要结论如下:1.南方鲇、鲫鱼和团头鲂的心脏、肾脏、肝(胰)脏、脑和红肌组织线粒体对底物的利用均存在偏好性,不同鱼种的相同组织线粒体对底物的利用偏好也存在差异。在复合体Ⅰ-型底物条件下,鱼体组织线粒体具有高的ATP转化效率,以及低质子漏率;在复合体Ⅱ-型底物条件下呈现出相反的趋势。2.在混合底物条件下,南方鲇、鲫鱼和团头鲂各组织线粒体的最大呼吸率总体高于单一底物条件下的值,混合底物条件下测定的状态3耗氧率可以反映出组织线粒体的最大代谢能力。3.南方鲇、鲫鱼和团头鲂各组织线粒体的呼吸率和CCO活性的水平差异均呈现相似的趋势:心脏线粒体的代谢能力最强,其次是红肌,脑、肝(胰)脏和肾脏组织的线粒体代谢水平则相对较低。4.不同鱼种的食性差异并未在线粒体的底物偏好利用上有所体现。5.在混合底物条件下,心脏线粒体最大耗氧水平可以反映不同鱼种的游泳模式及运动能力的差异,持续游泳运动能力越强的鱼,其心脏线粒体代谢能力越高。
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