【摘 要】
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目的:本研究通过建立动物模型,观察尿酸性肾病中肠道菌群组成的变化,并基于“肠-肾轴”理论,探讨姜黄素在尿酸性肾病中对肠道菌群的影响及其保护肾功能的作用机制。方法:将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。采用腺嘌呤（150mg/kg/d）联合氧嗪酸钾（250mg/kg/d）灌胃制备大鼠尿酸性肾病模型,连续造模4周。造模成功后,治疗组给予姜黄素（200mg/kg/d）灌
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目的:本研究通过建立动物模型,观察尿酸性肾病中肠道菌群组成的变化,并基于“肠-肾轴”理论,探讨姜黄素在尿酸性肾病中对肠道菌群的影响及其保护肾功能的作用机制。方法:将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。采用腺嘌呤（150mg/kg/d）联合氧嗪酸钾（250mg/kg/d）灌胃制备大鼠尿酸性肾病模型,连续造模4周。造模成功后,治疗组给予姜黄素（200mg/kg/d）灌胃,正常组和模型组给予等量的生理盐水灌胃,持续8周。实验结束后,处死大鼠并采集血液进行血清尿酸（UA）、肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）和内毒素（LPS）测定;HE及Masson染色观察肾脏病理改变;HE染色观察肠道病理改变,并进行组织学损伤评分;Western Blot法测定大鼠肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1的表达水平;采用高通量测序技术分析各组大鼠肠道菌群变化特点。结果:1.大鼠体重,血清尿酸、肌酐、尿素氮和内毒素水平变化:与对照组相比,模型组大鼠体重自实验第8周开始明显减轻（P<0.001）;与模型组相比,治疗组大鼠的体重自实验第10周开始逐渐增加。与对照组相比,模型组血清UA、Scr、BUN及LPS水平均明显升高（均P<0.001）;与模型组相比,姜黄素治疗显著降低大鼠血清UA、Scr、BUN和LPS水平。2.大鼠肾脏病理变化:HE和Masson染色结果显示,对照组肾脏组织形态正常,无病理学改变。HE染色结果显示,模型组肾脏有明显的病理变化,特征是肾小球硬化,炎性细胞浸润,大量的尿酸盐结晶在肾小管和间质中沉积;Masson染色结果显示,模型组的大鼠肾脏肾间质增宽并发生纤维化。与模型组相比,上述病理损伤在姜黄素治疗组中均得到不同程度的改善。3.大鼠肠道病理变化及组织学损伤评分:回肠HE染色结果显示,对照组肠道组织结构完整,绒毛排列整齐;模型组肠道组织病理学损伤明显,主要表现为炎症细胞浸润和完整的隐窝绒毛结构的缺乏;与模型组相比,治疗组大鼠的回肠组织损伤有明显改善。与对照组相比,模型组的肠道组织学损伤评分显著增高（P<0.001）;与模型组相比,治疗组组织学损伤评分明显降低（P<0.01）。4.大鼠肠道紧密连接蛋白表达变化:与对照组相比,模型组的ZO-1、occludin、claudin-1蛋白表达明显下降（均P<0.001）;与模型组相比,治疗组的ZO-1、occludin、claudin-1蛋白表达显著升高（均P<0.001）。5.大鼠肠道菌群组成变化:物种组成分析结果显示,在门水平上,与对照组相比,尿酸性肾病大鼠的厚壁菌门占比明显降低（P<0.01）,而变形菌门占比显著增加（P<0.05）;与模型组相比,治疗组在姜黄素干预后,厚壁菌门占比显著增加（P<0.01）,而变形菌门占比降低（P<0.05）;在属水平上,与对照组相比,模型组中大肠杆菌志贺菌属和拟杆菌属的占比显著增加（均P<0.01）;与模型组相比,大肠杆菌志贺菌属和拟杆菌属在治疗组中的占比明显下降。组间差异显著性分析（LEf Se分析）结果显示,在正常对照组中,拟普雷沃菌属、瘤胃菌属和梭菌目丰度较高;在模型组中,拟杆菌属、毛螺菌属和丹毒丝菌科丰度较高;在治疗组中,乳杆菌属和瘤胃菌属丰度较高。结论:1.尿酸性肾病大鼠的肠道菌群组成发生变化,主要表现为大肠杆菌志贺菌属和拟杆菌属等机会致病菌的增加,乳杆菌属等有益菌的减少。2.姜黄素可以通过调节肠道菌群,改善肠屏障功能,减轻肾脏炎症及纤维化,发挥保护肾功能的作用。
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