北京和潍坊鹦鹉四种疾病流行病学调查及基因型研究

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刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一类严格细胞内寄生性原虫,可以感染大多数温血动物(包括鸟类)。全世界大约有三分之一的人感染弓形虫,人是弓形虫的中间宿主,可以通过摄食没有煮熟的动物肉和被弓形虫卵囊污染的食物和水感染弓形虫。隐孢子虫(Cryptosporidium)是一种重要的人兽共患原虫,几乎可以感染所有脊椎动物。隐孢子虫是隐孢子虫病(Cryptospridiosis)是由隐孢子虫属(Cryptosporidium spp.)原虫感染导致的疾病。隐孢子虫可以导致哺乳动物(人)腹泻病和鸟类的呼吸道疾病。禽隐孢子虫首次由Tyzzer在鸟类中检测到,全世界已知有30多种禽类可以感染隐孢子虫。衣原体(Chlamydia)是一类严格寄生在真核细胞内的原核细胞微生物,可以引起人和多种动物的一系列疾病。衣原体感染可以引起呼吸困难、高热、呼吸道感染。戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus, HEV)是一类无囊莫的单链RNA病毒,隶属于肝炎病毒属。戊型肝炎病(Hepatitis E)是由戊型肝炎病毒引起的一种传染性疾病,该病呈全球性分布,特别是在发展中国家广泛流行。鸟类也可以作为戊型肝炎的哨兵动物。本论文采用改良凝集试验(MAT),检测了311份鹦鹉弓形虫血清抗体。结果显示:弓形虫阳性率为8.36%;不同的品种、性别、地区、年龄之间差异不显著(P>0.05),而夏季(11.63%)阳性率显著高于春季(4.32%,P<0.05)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和饱和蔗糖漂浮法,分别检测上述鹦鹉的血液和粪便,观察隐孢子虫感染情况。结果表明:ELISA阳性率为3.22%,饱和蔗糖漂浮法阳性率为0.64%,不同品种之间隐孢子虫抗体血清学阳性率有显著差异(P<0.05)。粪检的阳性样品提取DNA基因组,并扩增18SrRNA基因目的片段,经鉴定两个样品均为隐孢子虫禽基因V型。采用间接血凝试验(IHA),对上述鹦鹉进行了衣原体感染情况调查。为了解其鹦鹉热衣原体的基因型,扩增21份新鲜粪便样品中外膜蛋白A(ompA)序列,并构建进化树。结果表明:IHA阳性率为35.37%。本研究中鹦鹉的性别、品种和地理来源是衣原体感染的风险因素(P<0.05)。扩增出的两个阳性样品均为鹦鹉热衣原体基因A型。采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对上述311只鹦鹉的戊型肝炎病毒感染情况进行了调查。结果表明:鹦鹉戊型肝炎病毒血清学阳性率为6.43%。不同品种、性别、年龄、季节组的的差异不显著(P>0.05)。本研究首次对我国鹦鹉的弓形虫、隐孢子虫、衣原体和戊型肝炎病毒感染进行了血清流行病学调查及基因型鉴定,为这些动物疾病的进一步深入研究奠定了基础。
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