基于16S rDNA技术隔药饼灸对动脉粥样硬化兔肠道菌群的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:swrthy
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目的:采用高胆固醇饮食诱导法制备动脉粥样硬化兔模型,运用隔药饼灸对动脉粥样硬化兔进行干预,观察隔药饼灸对动脉粥样硬化兔血脂代谢变化、组织结构变化,探讨隔药饼灸对动脉粥样硬化兔肠道菌群多样性的影响。方法:健康纯种雄性新西兰大耳白兔42只随机分为6组:正常组、模型组、益生菌组、抗生素组、隔药饼灸组、隔药饼灸+广谱抗生素组。采用高胆固醇饮食诱导法制备AS兔模型,分别按各被试因素进行干预,干预结束后,禁食,耳缘静脉麻醉,腹主动脉采血,处死动物,分别取主动脉、肝脏组织、粪便、胆汁、肠组织、小肠内容物、盲肠内容物等,各组兔观察血脂水平和HE染色,采用肠道微生态16S r DNA分析技术探讨隔药饼灸对AS兔肠道菌群的调整作用应用。结果:1、HE染色:正常组:兔主动脉壁结构各层清晰可见,管腔内膜光滑、完整、连续,厚薄均匀,无脂质浸及,分布整齐、有序,无脂质斑点;模型组:中主动脉内膜明显增厚,向腔内突出,管壁内可见斑块和脂质沉积,大量泡沫细胞出现;益生菌组:内膜稍许增厚,各层结构仍清晰可见,管壁内皮细胞较连续,平滑肌细胞与隔药饼灸组一样呈整齐排列规则,些许泡沫细胞形成;抗生素组:内膜明显增厚,但各层结构清晰,管壁内皮细胞较连续,平滑肌细胞增生,大量泡沫细胞形成;隔药饼灸1组:内膜略微增厚,各层仍清晰可见,管壁内皮有连续性,平滑肌细胞厚度均匀、排列整齐,少见泡沫细胞;隔药饼灸2组:内膜增厚,各层结构清晰,管壁内皮细胞较连续,平滑肌细胞可见增生,少量泡沫细胞形成。与正常组比较,各组兔血清胆固醇、甘油三酯等水平均较高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,益生菌组、抗生素组、隔药饼灸1组、隔药饼灸2组兔血清胆固醇、甘油三酯等水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与抗生素组比较,隔药饼灸2组血清胆固醇显著降低(P<0.05)。与隔药饼灸2组比较,隔药饼灸1组血清胆固醇显著降低(P<0.05)。2、与空白组对比,模型组菌群多样性、均匀度略微有所上升,空白组模型组菌落构成存在差异;与模型组对比,隔药饼灸组菌群丰富度、多样性以及均匀度均有所上升;与模型组比较,益生菌组菌群丰富度、多样性以及均匀度均有所上升;与模型组对比,抗生素组和隔药饼灸加抗生素组菌群丰富度、多样性以及均匀度均有所下降;与抗生素组比较,隔药饼灸加抗生素组菌群丰富度多样性以及均匀度稍有下降。3、与空白组比较,模型组中毛螺科菌(Lachnospiraceae)、硬璧菌(Firmicutes)为优势菌种;与模型组比较,隔药饼灸组中阿克曼氏科菌(Akkermansiaceae)的菌种的相对占比在隔药饼灸组中增加,且蓝细菌(Cyanobacteria)、梅兰杆菌(Melainabacteria)、胃嗜气科菌(Gastranaerophilales)为优势菌种;与抗生素组比较,隔药饼灸加抗生素组中,阿克曼氏科菌(Akkermansiaceae)占比相对稍高。结论:1、隔药饼灸能有效调节血脂水平,抗生素会削弱隔药饼灸的作用,同时能改善动脉血管壁的损伤情况,抑制泡沫细胞的产生,抑制AS斑块的形成,但抗生素能削弱其作用。2、隔药饼灸对AS兔模型血脂水平和AS斑块的形成具有良性的调节作用,其中肠道菌群中阿克曼氏科菌(Akkermansiaceae)的相对占比与模型组比有增加,同时隔药饼灸组中蓝细菌(Cyanobacteria)、梅兰杆菌(Melainabacteria)、胃嗜气科菌(Gastranaerophilales)可能是发挥抗AS的重要菌群,而抗生素的应用能削弱其作用,具体机制与提高肠道菌群中阿克曼氏科菌(Akkermansiaceae)的含量有关。
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