【摘 要】
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鸡新城疫(Newcastle disease,ND)是由一种Ⅰ型副黏病毒-鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引发的一种急性传染病。未经免疫的鸡群,传播性极强,发病和死亡率都非常高,是
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鸡新城疫(Newcastle disease,ND)是由一种Ⅰ型副黏病毒-鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引发的一种急性传染病。未经免疫的鸡群,传播性极强,发病和死亡率都非常高,是世界公认的最重要的禽类传染病之一。本研究从山东地区采集疑似新城疫发病鸡样品,进行NDV分离鉴定,并对所分离的NDV野毒进行毒力及生物学性质测定,然后克隆F基因,通过测序,分析所分离的NDV野毒与标准毒株及流行株遗传进化关系。主要由3部分组成:1.NDV的分离鉴定采集疑似新城疫发病鸡样品,分离病毒,通过HI-HA、动物回归试验、外源病毒检测等方法,分离鉴定所得病毒样品,最终成功分离2株NDV病毒,并分别命名为NDV-SD-JN-09、NDV-SD-WF-10。2.NDV的噬斑纯化及生物学毒力检测通过噬斑试验对分离的2株NDV进行纯化,并分别测定MDT(鸡胚平均死亡时间)、ICPI(1日龄鸡脑内接种致病指数)及IVPI(6周龄雏鸡静脉致病指数)。结果表明,2株NDV野毒均为强毒。对经过蚀斑克隆纯化的病毒株的致病性作了重复实验,各毒株克隆纯化前后的毒力水平基本一致,表明分离物中的病毒组成是同源的。3.NDV F基因的克隆及遗传进化分析应用特异性引物分别扩增NDV F基因,通过电泳及测序鉴定无误,对F基因进行遗传进化分析,并结合山东地区近几年来的分离毒株的相关信息,着重分析近年来新城疫病毒F基因的变异情况。结果表明,本研究所分离的2株NDV野毒均属于基因Ⅶ型,F蛋白多肽裂解位点112R-R-Q-K-R-F117,属于NDV强毒。
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