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犬细小病毒（Canine Parvovirus CPV）的VP2基因编码主要衣壳蛋白，VP2基因在犬细小病毒感染过程中起着极为重要的作用，其编码CPV的主要抗原决定簇，可诱导机体产生中和抗体。 根据基因库中犬细小病毒基因序列设计合成了一对引物，其两端分别含EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点，从犬细小病毒扬州分离株提取基因组DNA，并以此为模板，进行聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增出VP2基因的1740bp的扩增产物，将PCR产物克隆进pUC18载体，并转化大肠杆菌TG1，通过LacZ基因的插入失活，初步筛选出重组质粒。通过限制性内切酶分析，得到CPV VP2阳性重组质粒。 对该分离株的VP2基因进行序列测定，结果表明：所扩增基因片段长度为1740bp,同美国参考株CPV-d（type 2）、CPV-15（type 2a）、CPV-39（type 2b）比较，核苷酸同源性分别高达99.5％、99.7％、99.7％，氨基酸同源性分别高达99.0％、99.7％、99.7％，表明VP2基因变异相对较少。 为探讨VP2蛋白的生物学特性，本研究还设计合成了另两对引物，其两端分别含EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点，以扬州分离株病毒DNA为模板，扩增了VP2基因的5’端和3’端大小为794bp、1041bp的两个片段。将PCR产物按预定的阅读框架插入表达性载体pGEX-6P-1中的谷胱甘肽-S-转移酶下游，获得的重组质粒在1.0mM IPTG和37℃条件下诱导，通过对重组大肠杆菌裂解物的SDS-PAGE电泳分析，鉴定出两条分子量分别为54kD和61kD表达条带。将表达产物从SDS-PAGE凝胶中切出回收，并用其免疫6-8周龄ICR小鼠，每周免疫一次，5次免疫后，采血分离血清，所得抗血清与犬细小病毒扬州分离株感染的胎猫肾细胞（FK81）进行间接免疫荧光试验（IFA），呈现特异性荧光，表明大肠杆菌表达的VP2基因产物保留了天然VP2蛋白的抗原性。 本研究对CPV扬州分离株的VP2基因序列分析，为探索CPV抗原漂变奠定了基础；而借助于大肠杆菌表达系统制备VP2的融合蛋白，为进一步研制VP2蛋白特异单抗及筛选CPV基因工程苗创造了条件。