研究背景哮喘是一种以气道高反应性、可逆性气流受限、气道炎症、不同程度的上皮下纤维化、粘液高分泌和气道重塑为主要特点，且发病机制仍不是很清楚的复杂性疾病[1]。研究发现，Th1/Th2比例失衡是哮喘主要发病机制之一[2]。CD4+T细胞被分为两个亚群，分别为Th1亚群和Th2亚群，Th1细胞主要分泌IFN-γ，介导细胞免疫，可负性调节Th2细胞引起的反应，抑制肺部过敏性炎症的发展；Th2细胞主要产生IL-4，IL-5，IL-13等，介导免疫和过敏性疾病[3]。研究证实哮喘与Th2细胞表达增多有密切关系，且已在哮喘动物及患者的血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）、气管活检组织中被证实[4,5,6]。IL-5可激活一系列嗜酸粒细胞（EOS）反应，能够与EOS受体结合，在调节EOS产生、分化、聚集、活化及延长成熟EOS生存期中具有重要作用[7]，IL-5可促进B细胞分化和增殖，并增强IL-4促进B细胞合成和分泌IgE的能力，还可促进嗜碱粒细胞聚集和活化，使粘液分泌增加，气道纤维化和气道重塑[8]。IL-13可调节IgE、肥大细胞、EOS活性，并介导气道高反应性（AHR）和粘液高分泌等，在哮喘的发病机制中具有重要的作用[9]。可溶性IL-5受体α（sIL-5Rα）可结合IL-5，抑制IL-5诱导的信号传导和细胞因子释放，抑制过敏原所致EOS分化，起免疫调节作用[10]。IL-13受体α2（IL-13Rα2）对IL-13有高亲和力，并作为一种诱骗受体，抑制IL-13的信号传导和反应[11]。IL-13Rα2存在三种形式，分别为胞膜蛋白、胞内蛋白和可溶性蛋白，其中可溶性IL-13Rα2（sIL-13Rα2）发挥重要作用。sIL-13Rα2可显著降低致敏原所致的AHR和炎症反应。支气管过量的IL-13Rα2可降低IL-13相关性STAT6磷酸化[12]。研究发现IL-5、IL-13可通过介导IgE、VCAM-1、STAT6使血管通透性改变，炎症细胞增生、迁移、浸润等，从而出现咳嗽、喘息、AHR等哮喘症状。目前我们尚未看到通过联合应用sIL-5Rα及sIL-13Rα2对哮喘小鼠IgE、IFN-γ、VCAM-1、STAT6水平影响的相关文献。本研究拟探讨联合应用sIL-5Rα和sIL-13Rα2对哮喘小鼠IgE、IFN-γ、VCAM-1、STAT6水平的影响，探索治疗哮喘的新方法。目的：1.通过观察联合应用sIL-5Rα及sIL-13Rα2对哮喘小鼠IgE、IFN-γ水平影响，了解哮喘的发病机制Th1/Th2比例失衡，并为哮喘治疗寻求新方法；2.通过观察联合应用sIL-5Rα及sIL-13Rα2对哮喘小鼠VCAM-1、STAT6水平影响，进一步探讨IL-5及IL-13在哮喘发病机制中的作用，以了解联合应用sIL-5Rα及sIL-13Rα2在哮喘治疗中的价值。方法：1.100只BALB/c小鼠随机分为两部分，各50只，分别用于实验第一部分和第二部分，每部分小鼠随机分为正常组、哮喘组、sIL-5Rα治疗组、sIL-13Rα2治疗组及联合sIL-5Rα、sIL-13Rα2治疗组（简称联合治疗组）。哮喘组及治疗组用鸡卵白蛋白（OVA）和氢氧化铝致敏，用OVA激发，建立小鼠哮喘模型，正常组用生理盐水代替，其中sIL-5Rα治疗组、sIL-13Rα2治疗组及联合治疗组分别于激发前30分钟腹腔注射100μgsIL-5Rα、sIL-13Rα2及联合应用sIL-5Rα及sIL-13Rα2各100μg，正常组和哮喘组激发前30分钟腹腔注射相同体积生理盐水；2.酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定各组小鼠BALF中IgE、IFN-γ水平及血清中IgE、IFN-γ、VCAM-1水平；3.免疫组化法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组小鼠肺组织STAT6水平变化。结果:1.①与正常组比较，哮喘组BALF及血清IgE水平均明显升高[(14.53±0.90）ng/mL vs （8.20±0.69）ng/mL及（1123.77±207.58）ng/mLvs （264.48±67.99）ng/mL]，IFN-γ水平均明显降低[（107.96±6.63）pg/mvs (371.4±32.92)pg/mL及（468.68±29.01）pg/mL vs （946.4±75.61）pg/mL]，差异具有显著性（P<0.01）。②与哮喘组比较，sIL-5Rα治疗组、sIL-13Rα2治疗组、联合治疗组BALF及血清IgE水平均明显降低（P<0.01）[分别为(12.42±0.40）ng/mL及（750.54±27.32）ng/mL、（12.49±0.38）ng/mL及（730.68±38.04）ng/mL、（10.82±2.17）ng/mL及（439.92±25.01）ng/mL]，IFN-γ水平均明显升高（P<0.01）[分别为（197.92±24.30）pg/mL及（590.51±28.24）pg/mL、（196.2±18.27）pg/mL及（574.9±26.61）pg/mL、（343.9±33.51）pg/mL及（861.4±36.31）pg/mL]。③与单用治疗组比较，联合治疗组可显著升高IgE水平，而降低IFN-γ水平，差异亦具有统计学意义（P<0.01）。2.①与正常组[（203.56±22.26）ng/mL]比较，哮喘组血清VCAM-1水平[(361.81±20.16)ng/mL]明显升高，差异具有统计学意义（P<0.01）；与哮喘组比较，sIL-5Rα治疗组、sIL-13Rα2治疗组、联合治疗组VCAM-1水平明显下降[分别为（311.61±25.13） ng/mL、（306.33±23.63） ng/mL、（248.51±19.32）ng/mL]，差异具有显著性（P<0.01）；与sIL-5Rα治疗组及sIL-13Rα2治疗组比较，联合治疗组血清VCAM-1下降亦具有统计学意义（P<0.01）。②免疫组化法及RT-PCR法结果显示：与正常组比较，哮喘组肺组织STAT6含量明显增加（P<0.01)；与哮喘组比较，sIL-13Rα2治疗组及联合治疗组肺组织STAT6含量明显降低（P<0.01），sIL-5Rα治疗组肺组织STAT6含量无明显变化（P>0.05）；与sIL-13Rα2治疗组比较，联合治疗组肺组织STAT6含量亦明显降低（P<0.01）。结论：联合应用sIL-5Rα及sIL-13Rα2可显著降低哮喘小鼠IgE、VCAM-1、STAT6表达水平，同时升高IFN-γ水平，从而减轻肺组织炎症、气道重塑等，最终达到缓解和治疗哮喘的目的，为临床治疗哮喘提供一个新的方法。