【目的】子宫内膜癌（Endometrial Carcinoma,EC）是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一。近些年,EC的发病率呈上升及年轻化趋势。发病率仅次于子宫颈癌且晚期患者5年生存率在逐年下降,生存率降低的原因在于复发和转移患者对EC的传统治疗手段往往不敏感。EC中存在一类可自我更新、分化的肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）,其表达细胞表面抗原CD133,对放化疗更具有抵抗力,被认为可能是EC发生、迁移、侵袭以及复发的根源。骨膜蛋白（periostin）是由肿瘤细胞及肿瘤间质细胞分泌,在肿瘤微环境中高表达,是CSCs和肿瘤微环境之间相互作用的关键介质。研究发现,periostin在人子宫内膜癌中高表达,且与EC的侵袭转移和恶性进展密切相关。然而,periostin在这群子宫内膜癌肿瘤干细胞（endometrial carcinoma stem cells,ECSCs）侵袭中参与的角色尚不清楚。本项目首先探讨periositn在不同分化程度子宫内膜癌组织中的表达情况及其与不同病理分级的关系,接着探讨periostin对ECSCs增殖和侵袭的影响,及其可能的作用机制。【方法】1、收集100例手术切除的EC组织及距病灶3cm的癌旁组织,用免疫组化、荧光定量PCR技术检测EC组织及癌旁组织中periostin的表达。2、流式细胞仪分选出子宫内膜癌细胞系Ishikawa CD133+细胞并培养,免疫荧光检测Ishikawa肿瘤细胞球中CD133的表达情况。Western bolt法检测CD133+Ishikawa和parental Ishikawa细胞中periostin的表达。3、构建针对periostin的sh RNA表达载体转染Ishikawa CD133+细胞,设立分组:sh NC、sh periostin-1、sh periostin-2和过表达periostin的载体转染亲本parental Ishikawa细胞,设立分组:oe vector、oe periostin。Western bolt法检测各组细胞中periostin蛋白表达水平,CCK-8和Transwell小室检测各组细胞的增殖和侵袭能力,Western bolt法检测各组细胞中Wnt信号通路蛋白（β-catenin、c-myc、Cyclin D1、GSK3β）的表达。【结果】1、EC组织的periostin表达高于癌旁组织（P<0.01）,且与EC病理分化级别成正相关（r=0.65,P<0.01）;2、ECSCs具有“干细胞”特性,能形成肿瘤球并表达干细胞标记物CD133。CD133+Ishikawa细胞periostin的表达高于亲本parental Ishikawa细胞（P<0.01）;3、Western bolt法检测periostin基因敲除和过表达periostin后各组细胞中periostin蛋白表达水平,sh periostin组periostin的表达是空载体组的0.3倍;过表达组periostin的表达是对照组的5倍。通过CCK-8和Transwell实验检测各组细胞的增殖和侵袭能力,结果显示:相比转染空载体组细胞,periostin sh RNA使CD133+Ishikawa细胞的增殖和侵袭能力减弱,且Wnt信号通路蛋白（β-catenin、c-myc、Cyclin D1、GSK3β）的表达明显减少（P<0.01）。Parental Ishikawa细胞过表达periostin慢病毒能增强其增殖和侵袭能力,表现为Wnt/β-catenin信号通路被激活。【结论】因此,EC组织中periostin的表达水平将有助于评价EC的生物学行为,具有临床研究意义。Periostin通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进ECSCs的增殖和侵袭。Periostin可能成为临床治疗EC的新靶标。