麻黄水提液体外抗RSV实验研究

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目的:探讨麻黄水提液在体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用及其作用机制,为治疗呼吸道合胞病毒感染寻找新型药物。方法:1、将中药麻黄加水熬制,采用负压抽滤后合并滤液,用减压蒸发的方法浓缩制成水提液。2、采用体外细胞培养技术,通过目测法和MTT法检测麻黄水提液对Hela细胞的毒性。3、以利巴韦林为阳性对照,对麻黄水提液进行体外抗RSV的药效学检测。用空斑减数实验测得麻黄和利巴韦林抑制RSV的半数有效剂量。用细胞病变抑制实验检测麻黄水提液对RSV的吸附与穿入的抑制作用以及其对RSV的直接抑制作用。用空斑减数实验检测麻黄水提液在不同浓度不同时间对RSV的抑制作用。结果:1、麻黄水提液对Hela细胞的半数中毒浓度(CC50)目测法为12.58mg/ml,MTT法结果为12.21 mg/ml,利巴韦林对Hela细胞的CC50目测法为0.42 mg/ml,MTT法为0.44 mg/ml。麻黄水提液对RSV的半数有效剂量(EC50)为3.74mg/ml,选择系数(SI)为3.26,利巴韦林EC50为35.66μg/ml,SI为12.34。2、麻黄水提液和利巴韦林对RSV吸附到Hela细胞上的过程和穿入细胞膜的过程均有明显的抑制作用(P<0.01);麻黄水提液对RSV还有直接抑制作用(P<0.05);5.00mg/ml、4.00mg/ml、3.20 mg/ml、2.56 mg/ml麻黄水提液4个剂量组在RSV感染后8小时内给药均能抑制RSV(P<0.05);各浓度间,相同浓度不同时间给药对病毒的抑制均有差异(P<0.05),时间和浓度两个因素之间存在交互作用。浓度越高,用药时间越早,抑制RSV的作用越大;浓度越低,用药时间越晚,对RSV的抑制作用越小。利巴韦林在8小时内给药也对RSV有抑制作用。结论:1、5.00mg/ml麻黄水提液能阻止RSV对细胞的吸附,也能抑制RSV对细胞膜的穿透。2、麻黄水提液2.5mg/ml时就对RSV有直接抑制作用。3、麻黄水提液5.00mg/ml、4.00mg/ml、3.20 mg/ml、2.56 mg/ml4个剂量组在感染8小时内给药均能抑制RSV,而且对RSV的抑制作用有明显的量效、时相关系。4、麻黄水提液在体外具有明显的抑制RSV作用。
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