木聚糖酶对草鱼肠道健康的作用及其机制

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本文旨在研究以植物性蛋白原料为主的日粮中添加木聚糖酶对草鱼生产性能和肠道健康的作用及其机制。试验采用单因子试验设计,共设6个处理,在基础饲料中分别添加不同水平的木聚糖酶[68(基础日粮含量)、594、1254、1880、2485和3076U/kg],饲喂初始体重为232.74±0.12 g的健康草鱼60天。生长试验结束后,进行为期14天的嗜水气单胞菌攻毒试验。实验主要结果如下:1)与对照组相比,添加1254 U/kg木聚糖酶显著增加了草鱼增重百分比(PWG)、特定生长率(SGR)和饲料效率(FE)(P<0.05);同时显著提高了肠长(IL)、肠重(IW)、肠长指数(ILI)和肠体指数(ISI)(P<0.05);2)与对照组相比,添加1254 U/kg木聚糖酶显著降低了有害菌数量(P<0.05),以及显著增加了有益菌的数量(P<0.05);3)与对照组相比,添加1254 U/kg木聚糖酶降低了13.96%的肠炎发病率(P<0.05);4)添加木聚糖酶提高了草鱼肠道免疫物质活力或含量;上调了抗菌肽mRNA水平,除了后肠防御素(β-defensin-1)和肝脏表达抗菌肽2A(LEAP-2B);下调了肠道IFN-γ2等促炎细胞因子的mRNA水平(除了前中肠IL-1β、IL-12p40和中后肠IL-6);上调了肠道IL-10等抗炎细胞因子的mRNA水平(除了中后肠TGF-β1、IL-4/13B和IL-11);5)添加木聚糖酶提高了抗氧化物活力或含量和抗氧化酶及各亚型(除了Cu Zn SOD)的mRNA水平,降低了活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、蛋白羰基(PC)含量;降低了caspase酶(除了中后肠caspase-3)、凋亡相关因子配体(FasL)、促凋亡Bcl-2蛋白和c-Jun氮端蛋白激酶(JNK)mRNA水平,升高了抗凋亡Bcl-2蛋白mRNA水平;上调肠道细胞的紧密连接蛋白ZO-1、occludin(前中肠除外)、claudin(-b、-c、-f、-3c、-7a、-7b和-11)的mRNA水平以及下调紧密连接蛋白claudin(-12、-15a、-15b)的mRNA水平。综上所述,木聚糖酶能够提高草鱼的生产性能、促进肠道生长、优化肠道微生物并增强肠炎抵抗能力。肠炎抵抗能力的提高与木聚糖酶提高了草鱼肠道的免疫功能和物理屏障功能有关,具体机制如下:1)通过抑制NF-κB和激活TOR信号分别抑制促炎细胞因子和促进抗炎细胞因子的基因表达,缓解炎症反应;2)通过激活Nrf2信号途径上调抗氧化酶表达,降低了氧化损伤;3)通过抑制JNK信号途径抑制死亡受体途径和线粒体途径,缓解了细胞凋亡;4)通过MLCK信号调控屏障紧密连接蛋白的表达,维持了细胞间结构完整性;此外,在植物性蛋白原料为主的日粮中,根据PWG和肠炎发病率确定的生长中期草鱼木聚糖酶的最适添加量分别为1527.65和1607.72 U/kg饲粮。
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