香菇液体菌种培养基优化及其菌种质量评价体系的建立

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香菇(Lentinula edodes)是一种著名的食药用真菌,香菇产业在我国食用菌产业中具有重要的地位。随着香菇产业不断发展和工厂化生产逐渐兴起,传统的固体菌种生产模式由于生产周期长而难以适应现代食用菌规模化、周年化生产的要求,而液体菌种因为具有生产周期短、菌种纯度高、污染率低、标准化程度高的特点更能满足工厂化生产的需求。本课题选用栽培区域广泛的栽培品种L808作为供试菌种,对香菇液体发酵培养基进行了优化,测定了菌丝体生长曲线,并利用优化培养基进行香菇液体菌种制备及栽培试验。本课题采用单因素试验确定了培养基中碳源为葡萄糖、玉米粉、细木屑,氮源为豆粕。单因素试验发现细木屑浸出液对于香菇菌丝生长有促进作用。采用正交试验得到优化的配方为葡萄糖2%,玉米粉2%,细木屑1.5%,豆粕1.2%,培养基C/N比为23.6:1,菌丝干重较优化前提高了307%。对培养基生长曲线进行测定,确定其发酵终点是培养11天;研究发现,细木屑对菌丝干重、菌丝生长速度、菌球密度有显著性影响。发酵过程中香菇菌丝各性状的相关性分析表明,菌丝干重与菌球直径、菌球密度呈极显著相关,菌球密度和菌球直径呈显著相关。菌种质量评价内容、评价方法和评价参数的研究表明,香菇液体菌种质量合格的标准为菌球直径<1200μm,菌球密度50±5个/m L,发酵液p H值<3.2,菌种在栽培料上24 h可萌发生长,显微镜下可观察到锁状联合。本研究表明,液体菌种接种至栽培料中的最佳固液比(W/V)为37.5:1-40:1。在秋栽试验中,接种7m L液体菌种时污染率最高达18%,接种量为12m L和17m L时污染率仅为2%,低于固体菌种的污染率(10%)。接种量为7m L、12m L和17m L时,菌丝满袋时间比固体菌种分别提前6.9 d、5.1 d和4.6 d,达到显著性差异水平。在香菇液体菌种春季栽培和秋季栽培试验中,接种液体菌种与固体菌种的子实体产量没有明显差异。在栽培基质中添加一定量的石灰与石膏,观察添加量对液体菌种萌发及生长的影响,结果发现石灰浓度越高,越能抑制菌丝萌发生长,而石膏浓度在0.5%-2%范围内对菌丝生长无显著性影响。
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