磷霉素转化菌株筛选及菌株转化特性研究

来源 :沈阳药科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ALIMHL
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本论文研究的目的物磷霉素(FOM)作为一种新型抗生素,虽然发现时间不长,但应用范围却越来越广泛。目前,磷霉素的工业生产主要应用化学合成的方式,东北制药总厂以顺丙稀磷酸为底物,采用化学方法合成磷霉素。磷霉素为旋光异构体,化学合成的产物为外消旋体,外消旋体拆分后,只有左旋磷霉素部分存在抗生素活性,所以整个合成过程会生成一半无抗生素活性的右旋磷霉素。磷霉素化学合成工艺存在的这种弊端,造成了原材料浪费、环境污染和成本较高等问题。开发磷霉素生物手性合成工艺也许是解决上述问题的一条可行途径。基于此种设想,本论文探索采用分步筛选模型,筛选出以右旋磷霉素为唯一碳源,生物转化产生左旋磷霉素的菌株。东北制药总厂有较长的磷霉素生产历史,其磷霉素生产车间长期堆放有右旋磷霉素,生产车间土壤所含有的天然菌群中可能存在符合我们要求转化菌株,故可作为菌源筛选具有右旋磷霉素转化能力的菌株。将从东北制药总厂采集的土壤进行初步筛选,得到备选菌株,再从初筛菌株中进一步挑选出13株细菌,进行混合菌株发酵实验,通过TLC法对混合菌株发酵液和左旋磷霉素标准品层析比对,初步认定发酵液中有左旋磷霉素产生。但初步判定并非13株细菌均有转化合成磷霉素的能力,于是我们将13株细菌分别发酵,将单菌株发酵液用生物法鉴定,逐步确定了其中有三株细菌起主要作用,三种磷霉素转化细菌分别编号为转化菌种1号、2号和13号。此三种菌株经中国科学院沈阳生态研究所环境微生物组鉴定,确认为红球菌属(Rhodococcus sp.)、节杆菌属(Arthrobacter sp.)、藤黄单孢菌属(Luteimonassp.),它们均为未曾报道过的磷霉素转化菌种。
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