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目的：本课题选择DR-nm23作为研究靶点,从分子生物学水平上研究DR-nm23在大肠癌细胞株中的表达情况及其对大肠癌细胞株生物学行为的影响,探讨DR-nm23与大肠癌发生、发展、浸润及转移的关系,并阐明其临床意义,为指导临床诊断、治疗及预后判断奠定理论基础。方法：应用RT-PCR技术筛选并确定高表达DR-nm23基因的大肠癌细胞株和低表达或无内源性DR-nm23基因表达的大肠癌细胞株；将DR-nm23基因稳定转染至无内源性表达的大肠癌细胞株中,观察转染前后对大肠癌细胞株体内及体外侵袭转移能力的影响；并通过统计分析得出结论。结果：1. DR-nm23在三种大肠癌细胞株：SW620、SW480和HT-29中的表达及临床意义在高转移性细胞株SW620中无内源性DR-nm23基因表达,中低转移细胞株SW480和HT-29有内源性DR-nm23基因表达,提示DR-nm23基因可能与大肠癌细胞株的转移性负相关。2.慢病毒构建,包装并稳定转染至SW620细胞株利用Age I酶切pGC-FU载体使其线性化,把PCR扩增的目的基因片段交换进入线性化的pGC-FU载体,交换后转化细菌感受态细胞,对所得的阳性克隆PCR鉴定和DNA测序后,将目的质粒转染293T细胞,经过Western-blot鉴定,最后把慢病毒包装,鉴定,并进行滴度测定,所得的带有目的基因的慢病毒转染SW620细胞株。3.DR-nm23基因过表达后对大癌细胞生物学特性的影响1)观察体外细胞的增殖情况,与SW620和转染空载体的SW620细胞相比,转染目的基因的SW620细胞增殖减慢,差异具有显著性意义(P<0.01)；平板克隆形成实验也显示转染目的基因的SW620细胞的单个细胞增殖能力较其它组显著减低,差异有统计学意义(P<O.01),这些结果均说明DR-nm23基因过表达后,肿瘤细胞体外生长被显著抑制。2) Transwell小室检测细胞体外运动能力的改变,结果显示DR-nm23基因过表达后,细胞的体外运动能力明显下降(P<0.01),说明DR-nm23过表达抑制了大肠癌细胞的体外运动能力。3)通过皮下成瘤实验观察DR-nm23基因过表达后对大肠癌细胞体内增殖能力的影响。将SW620、转染空载体的SW620细胞和转染目的基因的SW620细胞分别接种于裸鼠的皮下,通过30天连续的观察,发现DR-nm23基因过表达后,显著抑制了大肠癌细胞的体内增殖能力。4)通过结肠原位接种法体内转移实验,观察DR-nm23基因过表达后对细胞体内侵袭、转移能力的影响,结果显示在原始SW620细胞组和转染空载体的SW620细胞组都有(3／8)只,约37.5%的裸鼠形成肝转移。在转染目的基因后的SW620细胞组有(1／8)只,约12.5%裸鼠形成肝转移。结论：1.成功筛选出无内源性表达DR-nm23基因的细胞株SW620。2.成功获得DR-nm23基因稳定表达的大肠癌细胞株,为后续体内外实验研究DR-nm23基因对人大肠癌细胞增殖,粘附和侵袭能力的影响奠定基础。3.增殖实验、平板克隆实验和运动实验提示DR-nm23基因表达降低大肠癌细胞的体外增殖及运动能力。4.皮下成瘤实验及结肠原位接种法体内转移实验提示DR-nm23基因表达可显著抑制大肠癌细胞的体内增殖及转移能力。