应用低温冷冻技术保存牙齿的初步研究

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研究目的:自体牙移植是指用外科手术的方法将自体牙在口腔内易位移植,以期恢复根尖血运,完成再血管化。此类移植牙具有舒适、经济、美观的特点,且治疗周期短,患者痛苦少,因而认为自体牙移植是一项可以代替牙齿种植修复的方法。然而,自体牙移植因供体牙的取得时期与植入时间匹配存在困难而无法顺利开展,因此急需一种可以使自体牙长久保存的方法。生物深低温冷冻保存技术的运用为牙齿保存带来希望。本实验旨在探索不同冷冻保护液和冷冻方式对离体牙牙体组织生物力学性能及牙周膜细胞活性的影响,为后期进一步的实验研究和临床应用奠定基础。方法:(1)收集新鲜拔除的人第一或第二前磨牙75颗,随机分为5组,其中四组使用含海藻糖或不含海藻糖的冷冻保护液,分别应用程序降温或快速降温至-196℃,冷冻保存一周;一组新鲜拔除牙齿为对照组。(2)分别在体视显微镜下观察冷冻前后四组冷冻组标本的牙釉质表面是否有裂纹。(3)各组中随机抽出5颗制成实性块状牙体组织标本,测试其压缩强度和弹性模量;5颗于颊面颈部制备V类洞,树脂充填,经温度循环500周期后,2%亚甲基蓝溶液进行染料渗透实验,测量比较各组标本充填体边缘微渗漏情况;(4)另外5颗分别刮取牙根面中1/3的牙周膜组织,用消化法收集细胞,台盼蓝染色,在高倍镜下计数活细胞数,并计算细胞存活率。结果:(1)体视显微镜下观察冷冻前后四组冷冻组标本的牙釉质表面均无裂纹。(2)与对照组比较,不同降温方法不同冷冻保护液深冷冻后,牙体组织压缩强度和弹性模量、充填后微渗漏及牙周膜细胞存活率均无明显差异。其中,使用含海藻糖的冷冻保护液程序降温组的牙周膜细胞存活率最高。结论:应用低温冷冻技术保存牙齿,牙体组织生物力学性能、充填体边缘微渗漏及牙周膜细胞活性无明显变化。其中使用含海藻糖的冷冻保护液程序降温的方法对牙周膜细胞的活性影响最小。
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