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海洋硅藻是海洋生态系统最重要的初级生产者,占全球约20%的初级生产力。假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana)是一种单细胞海洋硅藻,在海洋生态系统等方面具有重要的应用价值。研究表明,假微型海链藻在氮限制环境中会积累大量胞内油脂,既可以作为水产养殖的饵料,也可以作为提炼生物柴油的原料。 本论文研究假微型海链藻分别在氮充足(硝酸氮浓度为882μM)和氮限制(硝酸氮浓度为182μM)条件下生理生化的影响,结合转录组和蛋白组方面的分析,探讨在氮限制条件下对外界环境胁迫的响应。研究结果表明: 1.与氮充足培养条件相比较,氮限制条件下,培养基内氮营养盐于培养的第四天耗尽,叶绿素a和叶绿素c的含量降低;胞内油脂含量显著升高;藻细胞胞内碳含量相差不大,而胞内氮含量总是低于+N组;Rubisco含量剧烈降低,稳定期含量仅为对数期的15%左右,约为同期+N组的30%。 2.转录组与蛋白组测序结果显示,光合作用、卡尔文循环、糖异生、氧化磷酸化途径显著降低、叶绿素合成也相应减慢;而糖酵解途径加快,氮的利用与代谢效率提高;未有确切证据表明脂肪酸β-氧化途径变得更加活跃。针对油脂合成相关基因的Real-Time PCR结果表明,挑选的11个基因中有9个基因表达丰度至少上调2倍,或许这正是藻细胞合成胞内油脂的原因。