Klotho基因多态性与重度继发性甲状旁腺功能亢进相关性研究

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目的研究klotho基因多态性与维持性血液透析患者发生重度继发性甲状旁腺功能亢进相关性以及甲状旁腺切除术对患者钙磷代谢的影响。方法研究组(B组)为167名长期维持性血液透析合并钙磷代谢紊乱者,其中87名患者因重度继发性甲状旁腺功能亢进已行甲状旁腺切除术为B1组,另外80名患者轻-中度继发性甲状旁腺功能亢进仅予内科保守治疗为B2组,对照组(A组)为60名同期健康体检者,分别采集A、B两组患者两管静脉血,其中一管血样本提取DNA并PCR扩增以一代测序法检测klotho基因G-395A位点单核苷酸多态性,另一管血样本予高速离心后取上层血清液用于ELISA法检测klotho蛋白、FGF23水平并采集患者同期各临床指标,分别比较A、B两组患者基因型及等位基因频率是否存在差异,同时比较行甲状旁腺切除术对维持性血液透继发性甲状旁腺功能亢进患者钙磷代谢及Klotho蛋白、FGF-23表达的影响。结果①所选取研究对象klotho基因G395A多态性位点分别表现为GG、GA、AA基因型,且基因分布符合Hardy-Weinberg平衡,具有一定的群体代表性。②A组和B组患者klotho基因G395A基因型及等位基因频率比较有差异(P<0.05),B组(维持性透析合并钙磷代谢紊乱组)其GA+AA基因型频率及A等位基因频率均高于A组(健康对照组)(P<0.05)。③B1组(重度继发性甲状旁腺功能亢进组)与B2组(轻-中度继发性甲状旁腺功能亢进组)患者klotho基因G395A基因型频率比较无明显差异(P>0.05),B1组A等位基因频率较B2组高(P<0.05)。④采用二元logistics回归分析发现携带A等位基因与早期发生重度继发性甲状旁腺功能亢进具有相关性(OR=0.462,95%CI 0.213-0.922,P=0.029)。⑤对所选研究对象进行pearson相关分析显示:FGF23与血磷、钙磷乘积及PTH水平呈正相关(r=0.314,P≈0.000;r=0.292,P≈0.000;r=0.389,P≈0.000);klotho 蛋白水平与血磷、钙磷乘积及PTH水平呈负相关(r=-0.447,P≈0.000;r=-0.389,P≈0.000;r=-0.355,P≈0.000)。⑥比较手术治疗及非手术治疗对B组患者的影响,B1组(手术组)血磷、钙磷乘积、PTH、FGF23水平均较B2组(非手术组)下降(P<0.05),B1组血钙、血红蛋白、白蛋白均较B2组上升(P<0.05),B1组与B2组klotho蛋白无明显差异(P>0.05)。结论①在研究人群中存在Klotho基因G-395A单核苷酸多态性。②klotho基因G-395A位点其等位基因A可能为ESRD及MHD患者并发重度SHPT的遗传易感基因。③klotho蛋白可能是MHD患者并发SHPT的保护性因素,FGF23可能是MHD患者并发SHPT的危险因素④甲状旁腺切除术可明显改善MHD并发重度SHPT患者钙磷代谢紊乱,对klotho蛋白表达无明显影响,可降低FGF23水平,可能改善MHD患者预后。
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