皂素类物质是茶资源中一类重要的功能成分,受到越来越多人的关注。由于皂素分子的结构和化学特性非常相似,以致皂素的分离和结构鉴定工作极具挑战。本研究采用UPLC分析茶籽中的皂素,并通过UPLC-Q-TOF/MS/MS鉴定出51种皂素类物质;利用中低压半制备型色谱仪获得了制备6种茶籽皂素单体的方法;建立了UPLC-PDA定量检测茶籽皂素的方法。主要研究结果如下:1.建立茶籽皂素的UPLC检测分析方法:采用Waters UPLC HSS T₃色谱柱（150 mm×2.1 mm,i.d.,1.8μm）;流动相:A相（0.1%甲酸/水）-B相（0.1%甲酸/乙腈）;采用梯度洗脱:0 min:35%B;4 min:37%B;32 min:37%B;58 min:45%B;60 min:35%B;柱温:25℃;流速:0.2 mL/min;进样量:5μL;检测波长:210 nm。该方法实现了首次在茶籽中有效分离出51种皂素类物质,并结合UPLC-Q-TOF/MS/MS,根据分子碎片信息以及文献资料,对这51种皂素类物质进行分析鉴定,其中有6种皂素为首次在茶籽中被发现。2.利用中低压半制备型色谱仪,进行二次制备,建立了高效稳定分离制备6种已知茶籽皂素单体的方法,其中,一次制备洗脱时间为26 min,得率为86.09%;二次制备洗脱时间为60 min,得率为92.00%。6种单体的纯度分别为:1,Assamsaponin G/Theasaponin E₁₂,92.20%;2,Theasaponin E₁,100.00%;3,Theasaponin B₅,96.16%;4,Assamsaponin A,98.88%;5,Assamsaponin B/C或Theasaponin E₅/E₉,91.56%;6,Theasaponin E₂/E₄/E₇/E₈,92.43%。3.利用分离得到的皂素单体Theasaponin E₁建立了茶籽皂素的定量检测方法,回归方程:y=8233.9x+43043,标准曲线的线性范围:0～1000μg/mL,决定系数0.9994,检测限为0.03μg/mL,定量限为0.09μg/m L。利用该检测方法测定茶籽70%甲醇提取物中的皂素含量为22.31%。