肺炎克雷伯菌耐药性监测及产ESBLs肺炎克雷伯菌ESBLs基因与可移动遗传元件的相关性分析

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目的:1.了解肺炎克雷伯菌耐药性变迁及其感染的相关危险因素。2.了解产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌ESBLs基因与可移动遗传元件(Mobile Genetic Elements,MGEs)标记基因的携带情况及其相关性。3.对产ESBLs肺炎克雷伯菌进行基因组DNA分型,了解产ESBLs肺炎克雷伯菌是否有暴发流行的现象。方法:1.采用WHONET5.6软件对2008-2018年肺炎克雷伯菌耐药情况进行回顾性分析,并分析2017年7月-2018年6月送检标本中分离出肺炎克雷伯菌的临床住院病历582例。2.收集从贵州省某三级甲等综合医院住院患者标本中分离出的产与非产ESBLs肺炎克雷伯菌非重复菌株各100株,采用普通PCR检测细菌中4种ESBLs基因(SHV-12、TEM-1、CTX-M-125、OXA-1)、8种MGEs标记基因(IntI1、IS26、ISEcp1、merA、tnp513、tnpU、traA、traC),并作指标聚类分析。3.采用ERIC-PCR对100株产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因组DNA进行分型,分析其同源性。结果:1.2008-2018年,肺炎克雷伯菌的检出率高,其对碳青霉烯类的耐药率最低,对头孢类等抗生素的耐药率在10%-60%之间且变化不明显。肺炎克雷伯菌感染相关危险因素研究结果显示,有创性检查或治疗、留置管使用是肺炎克雷伯菌感染的相关危险因素,其中留置管使用是肺炎克雷伯菌感染的独立危险因素。2.产ESBLs肺炎克雷伯菌中,ESBLs基因阳性率为100%;MGEs标记基因以IS26、ISEcp1、traA、trbC和intI1基因为主,阳性率高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌(P<0.05);ESBLs基因与MGEs标记基因的同时检出率明显高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌(P<0.05);ESBLs基因SHV-12、OXA-1与MGEs标记基因tnpU、tnp513、merA、intI1相关联,ESBLs基因TEM-1、CTX-M-125与MGEs标记基因ISEcp1、IS26、traA相关联。3.产ESBLs肺炎克雷伯菌中有99株扩增出条带,被分为93个型别,命名为A1-A93型,其中A1型3株;A2、A3、A4、A5型各2株,其他88个型别则表现出独特的DNA图谱。结论:1.医院需进一步改善抗生素使用方案,加强对肺炎克雷伯菌耐药性的监测。2.肺炎克雷伯菌感染的相关危险因素是留置管使用、有创性检查或治疗,其中留置管使用是肺炎克雷伯菌感染的独立危险因素。3.产ESBLs肺炎克雷伯菌ESBLs基因和MGEs标记基因存在相关性。4.产ESBLs肺炎克雷伯菌在医院内不存在暴发流行现象。
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