石菖蒲及其单体成分抗LPS诱导小鼠流产作用的研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zrbgo
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课题主要研究石菖蒲及其单体成分槲皮素、乙酸龙脑酯对细菌脂多糖(LPS)诱导流产小鼠的保胎作用。通过免疫组化检测子宫组织中CD4~+/CD8~+T淋巴细胞、巨噬细胞,流式细胞仪检测脾脏协同刺激分子CD80~+/CD86~+的表达以及ELISA方法检测子宫匀浆和血清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10和孕酮的含量变化,探讨石菖蒲及其单体成分的保胎作用及可能的作用机制,阐明妊娠早期母胎界面的免疫状态,寻找预防早期胚胎丢失的措施。试验分为6组,A组为对照组,B组为LPS流产模型组,C-E组分别为不同石菖蒲成分药物预防组,分别于孕4~7d灌服槲皮素、乙酸龙脑酯、槲皮素+乙酸龙脑酯和石菖蒲煎剂,孕7d尾静脉注射LPS(0.10μg/鼠),9d剖杀。结果表明LPS流产模型组的流产率和胚胎吸收率都达到100%,具有高CD4~+T淋巴细胞和巨噬细胞及偏向于Th1反应的特点,适合作为研究药物保胎作用的流产模型。预先口服不同石菖蒲成分后,流产率和胚胎吸收率都有不同程度的降低。其中以槲皮素+乙酸龙脑酯合用组的保胎效果最为明显,流产率和胚胎吸收率分别降至30%和28.6%,与LPS流产模型组差异极显著,基本达到正常水平。子宫组织中Th1型细胞因子IFN-γ的含量降低,Th2型细胞因子IL-4和IL-10含量升高,均较LPS流产组差异极显著;流式细胞仪检测小鼠脾脏CD80~+/CD86~+的表达,结果表明,应用保胎药物后能明显提升因LPS所引起的CD86表达抑制状态,协同刺激Th0细胞向Th2方向转化,产生有利于妊娠的Th2型细胞因子;免疫组化结果表明,应用保胎药物后,子宫组织中CD4~+T淋巴细胞和巨噬细胞的数量较LPS流产模型组显著降低,CD4~+/CD8~+比值基本恢复到正常水平,表明槲皮素和乙酸龙脑酯合用能够减少子宫中CD4~+T淋巴细胞和巨噬细胞的数量,对妊娠的维持起到保护作用。所以,LPS诱导小鼠流产与母-胎界面免疫平衡失调有关,中药石菖蒲通过减少子宫组织中CD4~+T细胞和巨噬细胞的数量,提升脾脏中CD86~+的表达,刺激Th0细胞向Th2方向转化,一方面增加Th2型细胞因子IL-4和IL-10的含量,另一方面降低Th1型细胞因子IFN-γ的水平,使Th1/Th2免疫平衡向有利于妊娠的Th2方向偏移,从而起到促孕保胎的作用。
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