研究目的:HOXA6是重要的转录因子,对DNA的转录过程起着调控作用,HOXA6基因在许多癌症中起致癌基因的作用。然而,HOXA6在胃癌发生发展中的作用尚不清楚。同时,利用生物信息学方法,我们发现HOXA6蛋白可能与PBX2相互作用以发挥致癌作用。已有研究证实,转录因子PBX2在胃癌中表达上调,并能促进肿瘤的侵袭、转移。HOXA6与PBX2能否相互作用,它们在胃癌转移的分子机制尚不清楚。本课题旨在阐明HOXA6在胃癌细胞发生过程中的作用,明确HOXA6对胃癌细胞侵袭与转移潜能的促进作用,并进一步揭示HOXA6通过何种途径作用于PBX2,进而促进肿瘤细胞侵袭迁移,为胃癌的诊断和治疗提供新的重要线索和可能的药物靶点。方法:1、Western blot检测HOXA6在胃癌组织和细胞中的表达情况。2、组织芯片进行免疫组化观察HOXA6在正常组织和胃癌组织中的表达,收集相应的临床病理资料,利用Kaplan-Meier生存曲线分析,观察HOXA6（+）或高表达/HOXA6（-）或低表达病人的预后。3.采用EdU、CCK8及平板克隆实验,检测HOXA6过表达表达胃癌细胞增殖。罗丹明-鬼笔环肽染色,共聚焦激光显微镜观察F-微丝的分布。采用划痕、Transwell及Matrigel侵袭小室等评估HOXA6的表达对肿瘤细胞侵袭转移。4.构建HOXA6 siRNA干扰慢病毒载体,建立裸鼠尾静脉肺转移模型,观察HOXA6 siRNA转移瘤的大小及数目,q-RT-PCR方法及免疫组化观察转移瘤中 HOXA6、E-Cadherin 表达。5.通过免疫共沉淀观察HOXA6与PBX2在细胞内的相互作用;通过放线菌酮实验检测PBX2与HOXA6稳定性。6.Western blot检测多种胃癌细胞PBX2和HOXA6的表达水平;免疫组化组化检测PBX2和HOXA6的表达;Spearman检验癌旁胃粘膜和胃癌组织中相关分析。7.体内检测PBX2和HOXA6过表达或敲低后q-RT-PCR及免疫组化观察转移瘤中 HOXA6、PBX2、E-Cadherin 表达。结果:1.HOXA6在胃癌组织和细胞中表达量均上调。2.HOXA6表达与胃癌患者的分化、淋巴结转移、AJCC分期、TNM分期及不良生存结局密切相关,与年龄、性别无关。3.过表达HOXA6可促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭;反之,HOXA6敲低则抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。4.HOXA6可以与PBX2发生相互作用并使其稳定。5.HOXA6和PBX2在胃癌细胞和胃癌组织中的表达均呈正相关,敲低HOXA6可逆转PBX2诱导的胃癌细胞迁移和侵袭能力;敲低PBX2可逆转HOXA6诱导的胃癌细胞迁移和侵袭能力。6.在体内,HOXA6可以促进胃癌细胞肺转移,敲低PBX2可逆转HOXA6诱导的肺转移的能力。结论:HOXA6在胃癌中表达明显上调,HOXA6高表达的患者与不良生存结局密切相关,HOXA6发挥致癌基因的作用;HOXA6过表达促进细胞增殖、迁移和侵袭,HOXA6可以与PBX2协同作用并使其稳定,HOXA6-PBX2轴可能是胃癌发生发展过程中的重要靶点,可能为胃癌的诊断和治疗提供新的重要线索和可能的药物治疗靶点。