线纹尖塘鳢和云斑尖塘鳢的遗传多样性研究

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线纹尖塘鳢和云斑尖塘鳢都俗称“笋壳鱼”,是重要的淡水名贵品种。本实验采用随机扩增多态性(RAPD)分析及线粒体DNA基因组COI基因和线粒体DNA基因组Cyt b基因分析为实验手段,对其进行遗传多样性分析,以了解两种尖塘鳢的遗传变异情况。主要结果和结论如下:(一)随机扩增多态性(RAPD)分析:运用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)技术对线纹尖塘鳢和云斑尖塘鳢的遗传多样性进行研究,以了解其遗传变异,为今后的遗传育种工作提供一定的理论支撑。实验结果显示:筛选出的9条随机引物在两个群体中共扩增出72条谱带,其中多态性谱带69条(95.83%);两个群体平均多态性位点比率(P)分别为80.54%和82.44%;平均Nei基因多样性指数(H)分别为0.2570和0.2760;平均Shannon信息指数(Hi)分别为0.3797和0.4105。两个群体间的平均遗传分化系数(Gst)为0.3022,遗传距离(Dxy)为0.3161,表明这两种尖塘鳢属鱼类的亲缘关系相对较远。研究表明两个群体均具有较高的遗传多样性,且遗传分化较明显。本研究结果为尖塘鳢属鱼类的标记辅助选择育种奠定了一定的理论基础。(二)线粒体DNA Cyt b基因测定线纹尖塘鳢和云斑尖塘鳢的Cytb基因全序列,并比较分析,结果显示碱基A、G、T、C在编码区序列中的平均含量分别为26.74%、14.54%、27.66%、31.06%。从中可以看出G含量最低,而C含量最高,A+T含量大于C+G含量。其核苷酸序列的同源性为85%,表明不同物种间Cyt b基因具有较高的同源性。本实验采用NJ法构建了5种塘鳢科鱼类以及溪鳢线粒体Cyt b基因的系统进化树,结果显示,云斑尖塘鳢和线纹尖塘鳢的亲缘关系最为接近,形成一个聚类分支,这与本研究中序列比对的结果相一致。(三)线粒体DNA COI基因测定线纹尖塘鳢和云斑尖塘鳢的COI基因全序列,并比较分析,结果显示碱基A、G、T、C在编码区序列中的平均含量分别为25.58%、17.7%、28.86%、27.87%。从中可以看出G含量最低,而T含量最高,A+T含量大于C+G含量。其核苷酸序列的同源性为86%。利用NJ法构建的系统进化树显示,云斑尖塘鳢与刺盖塘鳢的亲缘关系最为接近;而线纹尖塘鳢则与平头沙塘鳢的亲缘关系最近,这与Cyt b基因的研究结果以及两种尖塘鳢线粒体COI基因序列的高同源性有所差异,说明不同基因序列在揭示尖塘鳢亲属关系时存在一定差异。
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