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铜绿假单胞菌是临床中常见的条件致病菌之一,能够引起畜禽及人类较高的死亡率。铜绿假单胞菌存在固有抗药性,且随着抗生素使用,获得抗药性增强。在加强抗药性监测,精准使用抗生素的同时,噬菌体治疗是减抗降抗的理想选项。噬菌体特异性感染细菌,有比细菌更多的种类和数量,并且通过变异产生更多的可选择噬菌体,这解决了抗生素种类太少的局限;噬菌体在细菌中以每次上百数量复制,远超过细菌二分裂的效率,少量的噬菌体就能够在短期内使大量的宿主菌裂解死亡,并随着宿主菌消长,被动物机体代谢,解决了抗生素残留问题。本研究分离鉴定不同来源的铜绿假单胞菌及其特异性裂解性噬菌体,通过细菌抗药性流行病学分析、噬菌体生物学性质、基因组学和药理学分析,探索噬菌体与抗生素的联合抗菌作用规律,用于防治肉种鸡臭蛋,取得了可靠的结果。1.通过对山东省不同来源的164株铜绿假单胞菌进行O-抗原血清型、H-抗原鞭毛型分型,发现主要血清型为G型（27.16%）、I型（22.84%）、B型（10.49%）,其余血清型较为分散;鞭毛型与来源之间无显著相关性;貂源、鸡源及人源的菌株血清型和鞭毛型不相关,鸭源F血清型和鞭毛A型相关。2.对铜绿假单胞菌进行药敏检测,结果显示铜绿假单胞菌抗药水平较高,多重抗药比率为53.3%。对碳青霉烯类的美罗培南相对敏感,而对氟喹诺酮类的环丙沙星和氧氟沙星、头孢菌素的头孢噻肟和头孢他啶以及氨基糖苷类的庆大霉素有较高的抗药性,其中最普遍的多抗表型为CIP-CTX-GEN-CAZ-OFX。3.分离得到132株噬菌体,进行裂解谱测定,发现对142株铜绿假单胞菌裂解谱较宽,裂解率为10-52%;选择一株广谱噬菌体进行生物学特性测定,潜伏期30min,爆发期约为60min,效价为1.4×1013pfu·mL-1,稳定性较好,不存在抗药性基因、毒素基因和整合酶,在预防和治疗铜绿假单胞杆菌感染方面有潜在应用价值。4.建立了噬菌体药理学技术体系和研究方法,对噬菌体处理前后的细菌进行药敏检测,发现噬菌体处理后的细菌抗生素敏感性增强,且联合抗生素和噬菌体比单一使用抗生素或噬菌体的抑菌效果都增强,为应对高抗药性及多重抗药性菌株提供了联合用药可行途径。5.对肉种鸡孵化场的臭蛋进行菌群宏基因组16SrDNA分析和分离菌株感染鸡蛋回归试验,确定铜绿假单胞菌感染种蛋形成臭蛋;噬菌体涂抹种蛋蛋壳表面,可使铜绿假单胞菌所致的臭蛋率降低30%,且噬菌体不影响种蛋发育,安全性较高,可为种蛋孵化过程的噬菌体疗法提供了实验基础。